蛋白分析FAQ彙總
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在對奈米材料與I型膠原進行反應的測試過程中,如果你想使用圓二色譜(circular dichroism,CD)進行分析,需要注意一些關鍵點以保證實驗的準確性,希望以下建議可以幫助到您: 1.蛋白質與奈米材料的準備:首先,需要分別準備膠原蛋白和奈米材料的溶液。對於膠原蛋白
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蛋白質圓二色譜(CD,Circular Dichroism)分析是一種常用於研究蛋白質二級結構的方法。在進行這樣的實驗後,通常需要專門的分析軟體來解讀資料,一些常用的軟體主要包括: 1.DichroWeb: 一個線上分析工具,它提供了多種演算法,可以估計蛋白質的二級結構
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• 你好,我正在做蛋白交聯,想知道使用了交聯劑之後樣品如何處理呢?直接加入裂解液裂解嗎?
在交聯法蛋白相互作用分析實驗中,使用了交聯劑(如甲醛)對細胞進行處理後,通常需要先停止交聯反應,比如透過新增Tris緩衝液、甘氨酸或者透過快速將細胞冷卻至4°C來實現。細胞交聯後,可以進行冷凍儲存,或者立即進行裂解。 以加入甘氨酸為例: 1.交聯後加入甘氨酸(gl
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• 請問蛋白交聯下一步是直接裂解細胞嗎?用什麼裂解液比較好呢
蛋白交聯(protein crosslinking)是在細胞生物學和分子生物學中常用的實驗手段,其主要目標是穩定細胞內的蛋白質-蛋白質相互作用。一般來說,交聯之後的下一步確實是裂解細胞(cell lysis)。裂解的目的是開啟細胞,釋放其中的蛋白質等生物大分子。 使用哪
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"DSS" (二磺基三氮唑基丙酸二酯,Disuccinimidyl suberate)是一種常見的化學交聯劑,主要用於研究和穩定蛋白質之間的相互作用。DSS在室溫下以NHS酯的形式活化,可以與蛋白質的氨基酸氨基反應生成共價鍵。 使用DSS進行蛋白質交聯的具體步驟可能會根
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• 交聯法蛋白相互作用分析:我今天試了一下,是不是跑交聯之前,還要看定量呢?
是的,在進行交聯實驗以研究蛋白質之間的相互作用前,確實需要先進行蛋白質的定量。這個步驟非常重要,因為交聯實驗的結果會受到起始蛋白質濃度的影響。 在新增交聯劑之前,我們需要知道蛋白質樣品的確切濃度,以便正確計算所需的交聯劑量。如果蛋白質濃度過高或過低,都可能導致交聯效率不佳
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• 交聯法蛋白相互作用分析:做蛋白質結構解析,怎麼選交聯劑呢
交聯劑的選擇對於蛋白質結構解析來說是非常重要的步驟。在選擇交聯劑時,你需要考慮以下幾個因素: 1.交聯劑的反應性:不同的交聯劑對不同的氨基酸側鏈具有不同的反應性。例如,一些交聯劑主要針對含有氨基或羧基的氨基酸,而其他一些則對含有硫醇基的氨基酸有反應。 2.交聯劑的
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• 2D-DIGE進行定量蛋白質組學分析,為什麼實驗中有Analytical Gel和Prep Gel步驟?
差異凝膠電泳2D DIGE 進行定量蛋白質組學分析,一般從分析凝膠開始實驗,原因如下: 分析凝膠檢測時,一般使用大約 25 µg 樣品,而製備凝膠使用大約 250 µg 每個樣品。分析凝膠的總蛋白上樣量約為 75 µg,而製備凝膠的總蛋白上樣量約為 750 µg。由於分析凝膠含有較少的樣品量
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• 用iProphet檔案構建庫但Skyline無法識別,是否可用Spectrast構建庫再匯入Spectrast可以編寫的格式?
可以將SpectraST輸出的.sptxt檔案與Skyline一起使用。此外,我們確實支援iProphet的結果,甚至提供了大量使用iProphet分析的資料。 相關服務: DIA定量蛋白質組學
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• iRT肽在Skyline分析中的是必要的嗎?使用“典型”肽進行保留時間校準是否可靠,是否應該始終使用iRT肽?
在Skyline中可以使用內源肽作為iRT的保留時間標誌,您無需購買和加入為此目的而設計的試劑混合物。 相關服務: DIA定量蛋白質組學
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