單細胞質譜流式技術分析

    隨著現代生物學的發展,“平均值”這個詞已經不能滿足我們的研究需要了,我們需要更進一步瞭解細胞之間的差異性,於是針對單細胞的各類研究技術應運而生。單細胞質譜流式(Mass Cytometry)技術是利用質譜技術對單細胞進行多引數檢測的流式技術,它既有傳統流式細胞術能夠高速分析的特點,又兼併了質譜檢測的高分辨能力。單細胞測序和質譜流式都是目前非常強大的技術,越來越多的高分文獻都是將兩者結合使用,兩者不能說有優劣之分。區別在於質譜流式針對蛋白進行檢測,能夠指定檢測蛋白,避免漏掉丰度很低但又很重要的蛋白,且質譜流式技術因為其通量相當的高,可以實現大量細胞的檢測,都是對單細胞測序一個很好的補充。百泰派克生物科技單細胞質譜流式技術採用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然後用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,最後將原子質量譜資料轉換為細胞表面和內部的訊號分子表達量。
    單細胞質譜流式技術

    McCarthy, R. L. et al. J. Vis. Exp. 2017.

    單細胞質譜流式技術


    單細胞質譜流式技術優勢:
    1,技術先進,填補技術空白
    單細胞質譜流式採用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表徵,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

    2,分析數量大,成本較低
    單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞彙總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高於單細胞RNAseq。

    3,應用前景大
    a)流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
    b)將金屬標籤技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用於蛋白翻譯後修飾;
    c)可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
    單細胞質譜流式實驗流程
    百泰派克生物科技採用Fluidigm質譜流式系統進行樣品分析
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    單細胞質譜流式技術資料分析


    單細胞質譜流式技術的應用
    質譜流式可做的功能分析可分為12類:
    (A) 表型表徵
    (B) 細胞內細胞因子測定
    (C) 細胞內訊號狀態表徵
    (D) 細胞體積和尺寸測量
    (E) 細胞活力鑑別
    (F) 細胞週期鑑定
    (G) 增殖示蹤
    (H) 受體佔有率測定
    (I) 基於四聚體的抗原特異性T細胞篩選
    (J) 染色質修飾分析
    (K) RNA 和蛋白質共檢測
    (L) 成像質譜流式細胞術

    單細胞質譜流式技術在疾病研究、疾病治療中均有廣泛應用,以新型冠狀病毒研究為例:
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