糖譜檢測

糖基化是蛋白質的一種重要的翻譯後修飾。根據糖鏈和肽鏈的連線方式的不同，蛋白質的糖基化可分為N-糖基化和O-糖基化。N-糖基化是透過糖鏈的還原端的N-乙醯氨基葡萄糖(Glc-NAc)和肽鏈中某些Asn側鏈醯氨基上的氮原子相連。能接有糖鏈的Asn必須處於 Asn-X-Ser/Thr 3殘基構成的基序(motif)中，其中X可為除Pro的任意的氨基酸殘基。O-糖基化的結構比N-糖基化簡單，一般糖鏈較短，但是種類比N-糖基化多得多。肽鏈中可以糖基化的主要是Ser和Thr，此外還有酪氨酸、羥賴氨酸和羥脯氨酸，連線的位點是這些殘基側鏈上的羥基氧原子。百泰派克生物科技基於高解析度質譜儀Obitrap Fusion Lumos，利用包含了幾乎所有糖型的Byonic軟體針對肽段、蛋白和抗體藥物進行糖基化分析，可以確定肽段或者蛋白樣品糖基化位點、N糖/O糖型別、糖基化位點糖組成。



 


糖譜檢測和分類

 

案例分析：

服務案例為對一位客戶提供的重組蛋白藥物進行糖譜檢測。拿到客戶提供的理論序列之後，我們首先對序列進行了分析以確認適合專案使用的蛋白酶；通常情況下，我們會選擇兩種以上的蛋白酶進行酶切，以提高的肽段覆蓋率；使用不同的蛋白酶進行酶切，產生不同的肽段序列，利用肽段序列相互之間的互補關係，幫助提高糖譜分析的肽譜覆蓋率。以下是之前專案的部分實驗資料，該專案中客戶提供的是重組蛋白樣品，在我們選擇了合適的蛋白酶組合之後，肽段覆蓋率如下圖所示：



 



 




該專案中，與理論序列相比，肽段覆蓋率為94%，未鑑定到的6%的序列為訊號肽，在重組蛋白分泌過程中已經被切掉，因此實際的肽段覆蓋率為100%。

經過Byonic軟體分析之後，鑑定到的糖肽相關總結如下：



 




在結題報告中，我們還會提供鑑定到的每一個糖肽的二級質譜圖資訊，如下圖所示：



中/英文專案報告

在技術報告中，百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括：

1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關的質譜引數（中英文）
3. 質譜圖片
4. 原始資料
5. 糖譜檢測結果

生物藥糖譜檢測一站式服務

您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務完成：樣品處理-上機分析-資料分析-專案報告

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