蛋白分析FAQ彙總

• • 你好請教些問題 亞硝基化修飾位點打不出來是什麼原因呢？

  亞硝基化修飾位點打質譜打不出來，可能是由於以下幾個原因： 樣品製備問題： 如果你在進行樣品的製備過程中出現了錯誤，或者樣品的儲存和處理不當，可能會導致亞硝基化修飾蛋白的丟失或降解。 方法選擇問題： 亞硝基化修飾的位點鑑定需要專門的資料庫和軟體支援，如果沒有

• • 蛋白質序列分析有X怎麼辦？

  蛋白質序列分析中如果出現X，通常表示無法確定該位置的氨基酸殘基。X是蛋白質序列中的一種缺失標記，可能是由於實驗或測序中的技術問題導致的。在一些情況下，X也可能表示未知的或異常的氨基酸。當蛋白質序列中出現X時，需要注意以下幾點：1.確定缺失位置：首先，需要確定X所在的具體位置。這可以透過測序資

• • 氣相色譜法根據峰面積和保留時間怎麼求樣品質量濃度?

  氣相色譜法（Gas Chromatography，GC）是一種常用的分析方法，它可以根據樣品中不同成分的保留時間和峰面積來分析樣品的質量濃度。具體操作步驟如下：1.建立標準曲線：首先，需要測定不同濃度的標準溶液的氣相色譜圖譜，分別記錄各組分的保留時間（Retention Time, tR）和

• • 如何純化微管蛋白？

  微管蛋白（Microtubule proteins）是細胞骨架的主要組成部分，包括α-和β-微管蛋白亞基。純化微管蛋白涉及多個步驟，以下是一種常用的純化方法：1.細胞收集：首先，選擇適合的細胞系，並將細胞收集在離心管中。透過離心將細胞沉澱下來，去除培養基。2.細胞破碎：將細胞懸浮在微管穩定緩

• • 做蛋白質測序時，切下來的SDS蛋白條帶含有不止一條蛋白條帶怎麼辦？

  當切下來的SDS蛋白條帶含有不止一條蛋白條帶時，這些條帶可能代表著多個蛋白質或不同的蛋白質異構體（例如不同的翻譯產物或翻譯後修飾形式）。在這種情況下，需要進一步分離和純化這些蛋白質，以便單獨鑑定每個蛋白質的氨基酸序列。通常，可以使用以下方法來處理含有多個蛋白條帶的SDS膠：1.SDS-PAG

• • 一個蛋白一個化學藥物小分子可以採用GST PULL down嗎？

  GST Pull-Down 實驗主要用來鑑定蛋白-蛋白間的相互作用。這種方法的原理是透過轉基因方式將目標蛋白質與谷胱甘肽 S-轉移酶（Glutathione S-transferase, GST）基因融合，利用GST蛋白與谷胱甘肽(Glutathione)的高親和性，將GST融合蛋白與小鼠抗

• • 蛋白的肽鏈是如何測序的？

  蛋白的肽鏈測序是指確定蛋白質中氨基酸序列的過程。它是透過將蛋白質分解為小片段（肽段），然後對這些肽段進行測序來實現的。目前常用的方法是質譜法和DNA/RNA測序方法。1.質譜法測序：A.製備樣品：將蛋白質進行消化，通常使用酶（如胰蛋白酶）將蛋白質分解為小肽段。B.質譜分析：使用質譜儀對肽段進

• • 怎麼看哪個蛋白差異顯著？

  要尋找顯著差異的蛋白質，通常需要利用生物資訊學方法進行差異表達蛋白質分析，常用的生信統計方法如t檢驗、方差分析、Wilcoxon等，這些方法將產生每個蛋白質的差異表達值（例如，fold change，log2(fold change)等）以及統計顯著性指標（如p-value或校正後的p-va

• • 熒光定量PCR檢測蛋白家族各成員時，有無必要先對擴增產物進行測序，以免李代桃僵？

  熒光定量PCR（Polymerase Chain Reaction）是一種用於快速檢測和定量DNA或RNA的技術，可以在反應中引入熒游標記物，實時監測PCR產物的增加情況。對於蛋白家族各成員的檢測，熒光定量PCR可以用於定量分析它們的相對錶達水平，但並不能提供關於具體蛋白序列的資訊。因此，對

• • 您好想要二維凝膠電泳的流程圖

  我們可以提供二維凝膠電泳的主要流程供您參考： 1.樣品準備：首先收集和準備需要進行電泳的蛋白質樣品。 2.第一維：等電聚焦（IEF）：在第一維電泳中，利用蛋白質在一定pH範圍內的等電點（pI，即蛋白質不帶電的pH值），使蛋白質在電場中沿pH梯度運動，從而實現分離。