蛋白分析FAQ彙總

• • WB條帶跑得很粗為什麼，感覺好像蛋白和loading分開了?

  當Western blotting（WB）條帶跑得很粗時，可能有幾個原因導致蛋白和loading分開的現象。下面我將逐步解答這個問題。 蛋白負載量過高：如果在樣品中載入了過多的蛋白負載量，條帶可能會變得很寬。這是因為過多的蛋白負載量會導致蛋白在凝膠中擴散，使得條帶變得模糊不清。解決這個問

• • SDS-PAGE凝膠電泳測真菌蛋白，最後洗脫後沒有條帶，而是成團？

  SDS-PAGE凝膠電泳是一種常用的蛋白質分離和分析技術，可以根據蛋白質的分子量將其分離成不同的條帶。如果在測定真菌蛋白時，沒有觀察到條帶而是成團的現象，可能有以下幾個原因： 樣品載入量過高：如果載入的真菌蛋白樣品過多，可能會導致蛋白質在凝膠中聚整合團，而不是形成清晰的條帶。在進行SDS

• • 為啥我跑sds-page的時候不是一直線?我用乙醇沉澱蛋白，碳酸氫銨復溶?

  SDS-PAGE 是一種常用的蛋白質分離技術，用於根據蛋白質的分子量進行分離。如果你的結果不是一條直線，可能有以下幾個原因： 樣品載入量過多或過少：如果你載入的樣品量過多，可能會導致帶狀模糊或重疊；如果載入的樣品量過少，可能會導致帶狀模糊或訊號弱。建議最佳化樣品載入量，使其適中。 樣品預處

• • 用SDS-PAGE法可以測定血紅蛋白的分子量嘛？

  當然可以使用SDS-PAGE法來測定血紅蛋白的分子量。SDS-PAGE法是一種常用的蛋白質分析方法，透過電泳分離蛋白質，根據其遷移速度來確定蛋白質的分子量： 首先，需要將血紅蛋白樣品進行處理。由於血紅蛋白是一種帶有負電荷的蛋白質，爲了使其在電泳過程中能夠均勻地分散在凝膠中，需要將其與SD

• • SDS凝膠電泳測定蛋白質分子量時，為什麼老師要我們兩邊不要點樣(說什麼倒電作用)，求大神解答?

  SDS凝膠電泳透過電泳將蛋白質分離並測定其分子量。在這個過程中，SDS（十二烷基硫酸鈉）被用來給蛋白質樣品新增負電荷，使其在電場中向陽極遷移。在SDS凝膠電泳中，電泳緩衝液中的離子會在電場作用下向陽極或陰極遷移。當樣品點在凝膠兩邊時，電泳緩衝液中的離子會在樣品點周圍聚集，形成電場梯度。這個電

• • SDS蛋白條帶太細了，也能夠鑑定蛋白嗎？

  蛋白質條帶的寬度或明顯度並不直接決定其鑑定的可行性。主要的考慮因素是: 條帶的定量：即使條帶很細，如果蛋白質的量足夠多，仍然可以進行進一步的分析，例如透過質譜分析進行鑑定。 背景：如果背景很清晰，即使條帶很細，也可能很容易地將其與背景區分開來。 鑑定方法的靈敏度：使用質譜進行蛋白

• • 凝膠色譜法分離蛋白質的原理是什麼？

  凝膠色譜法（也稱為凝膠滲透色譜、凝膠過濾色譜或分子篩色譜）是一種常用的蛋白質分離和純化技術，其原理基於蛋白質在凝膠介質中的分子大小和形狀的差異。 凝膠色譜法使用的凝膠介質通常是由聚丙烯醯胺或瓊脂糖等物質製成的，可以形成一種三維網路結構。凝膠介質的孔徑大小決定了蛋白質在凝膠中的分子擴散速率，

• • 圓二色譜的資料可以用哪些軟體計算出多肽的不同二級結構所佔比例呢？

  當使用圓二色譜技術研究蛋白質的二級結構時，可以使用多種軟體來計算不同二級結構所佔的比例： 1.DICHROWEB：DICHROWEB是一個線上工具，可以用於分析圓二色譜資料並預測蛋白質的二級結構。它基於多個已知的二級結構資料庫和演算法，可以根據輸入的圓二色譜資料給出二級結構的預測結果。

• • 凝膠色譜法提取血紅蛋白時，一定是大分子先出來嗎，有沒有可能少量小分子一起出來，這個方法嚴謹嗎？

  凝膠色譜法是一種常用的蛋白質分離和純化方法，它基於蛋白質在凝膠柱中的分子大小和形狀的差異進行分離。在凝膠色譜法中，大分子通常會先出來，但也有可能少量小分子與大分子一起出來。下面我將詳細解答你的問題： 1.凝膠色譜法的原理：凝膠色譜法是基於分子在凝膠柱中的分子大小和形狀的差異進行分離的。凝膠

• • 離子交換色譜提純蛋白質的解析度有多好？

  離子交換色譜（Ion Exchange Chromatography，簡稱IEC）是一種常用的蛋白質分離和純化技術。它利用固定在色譜柱上的離子交換基團與蛋白質中的帶電氨基酸殘基之間的相互作用來實現分離。解析度是衡量色譜技術分離效果的重要指標，它反映了樣品中不同組分之間的分離程度。 1.解析