凝膠色譜法分離蛋白質的原理是什麼？

凝膠色譜法（也稱為凝膠滲透色譜、凝膠過濾色譜或分子篩色譜）是一種常用的蛋白質分離和純化技術，其原理基於蛋白質在凝膠介質中的分子大小和形狀的差異。

 

凝膠色譜法使用的凝膠介質通常是由聚丙烯醯胺或瓊脂糖等物質製成的，可以形成一種三維網路結構。凝膠介質的孔徑大小決定了蛋白質在凝膠中的分子擴散速率，從而影響了蛋白質的分離效果。透過調節凝膠介質的孔徑大小，可以實現對蛋白質的分子大小分離。較大的蛋白質分子無法進入較小的孔徑，因此會在凝膠中較快地透過，而較小的蛋白質分子則會在凝膠中停留更長時間。這樣，不同大小的蛋白質分子就可以被分離開來。

 

除了分子大小，凝膠色譜法還可以根據蛋白質的形狀差異進行分離。由於蛋白質的形狀多樣性，不同形狀的蛋白質在凝膠中的擴散速率也會有所不同。一般來說，較大的、球狀的蛋白質分子會在凝膠中擴散較慢，而較小的、線狀的蛋白質分子則會擴散較快。因此，凝膠色譜法可以透過調節凝膠介質的孔徑大小和性質，實現對蛋白質形狀的分離。

 

此外，凝膠色譜法還可以利用親和性進行蛋白質的選擇性分離。親和色譜是一種特殊的凝膠色譜技術，透過在凝膠介質中固定特定的配體或抗體，可以選擇性地捕獲目標蛋白質。這種方法常用於純化特定蛋白質或富集蛋白質複合物。

 

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