蛋白分析FAQ彙總

  • • 蛋白質電泳技術的種類有哪些,其原理和實驗方法是什麼?

    蛋白質電泳技術是一種在電場作用下,使蛋白質沿電泳介質移動的技術。蛋白質的移動速度與其大小、電荷和形狀有關。以下是一些常用的蛋白質電泳技術及其原理和實驗方法: 1.連續系統SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrop

  • • 血清蛋白電泳時,為什麼點樣處不能接觸電橋?

    當我們進行血清蛋白電泳實驗時,點樣處不能接觸電橋,主要有以下幾個原因: 1. 電泳效果的影響:電泳是透過電場的作用,使帶電的蛋白質分子在凝膠中沿電場方向運動,從而實現分離。如果點樣處接觸到電橋,會導致電流直接從電橋流過,而不是透過凝膠,這樣就會影響電泳的效果,使得蛋白質不能正確地分離。

  • • 蛋白質電泳為什麼有向負極移動的?

    蛋白質電泳中,蛋白質向負極還是正極移動取決於其在電泳緩衝液中的電荷。蛋白質的電荷是由其氨基酸殘基的電荷決定的,這些電荷在特定的pH下會變化。蛋白質的電荷與溶液的pH以及蛋白質的等電點 (pI) 有關。 等電點 (pI) 是指蛋白質淨電荷為零的pH值。在這個pH值以下,蛋白質的淨電荷為正;在這

  • • 如何根據電泳結果測定目標蛋白的純度?

    電泳結果只能提供關於蛋白質大小和電荷的資訊,而不能直接測定蛋白質的純度。但是,我們可以透過一些間接的方法來評估蛋白質的純度。  電泳完成後,我們需要對凝膠進行染色以便觀察蛋白質帶。 透過觀察電泳影象,我們可以大致評估目標蛋白的純度。如果只有一個明顯的蛋白質帶,並且該帶的位置與預期的目標蛋白

  • • 如何準確分離蛋清蛋白?

    蛋清蛋白,也被稱為雞蛋白或卵清蛋白,是指雞蛋中蛋白質的液態部分(不含蛋黃)。蛋清主要由蛋白質(如卵白蛋白、卵凝蛋白、卵黃素和球蛋白)和水組成。爲了準確地分離蛋清蛋白,通常採用以下步驟: 1. 採集蛋清: 首先,我們需要從雞蛋中分離出蛋清。可以透過輕輕敲擊雞蛋殼,將蛋清倒入一個乾淨的容器中。

  • • 兩次電泳跑出的marker相同但是蛋白質樣品不同,什麼原因啊?

    當你在進行兩次電泳實驗時,如果marker相同但蛋白質樣品不同,可能有以下幾種原因: 1. 樣品製備的差異: 樣品製備過程中的差異可能導致電泳結果的不同。例如,蛋白質的濃度、pH值、離子強度等因素都可能影響電泳結果。如果兩次實驗中的樣品製備條件不同,可能會導致電泳結果的差異。 2. 電泳

  • • 分離蛋白質原理都有哪些?

    蛋白質分離是生物化學和分子生物學中的一個重要步驟,不同的蛋白質分離技術原理可能也不同: 1. 沉澱法:這是最常用的蛋白質分離方法之一。它利用蛋白質在特定的溶液條件下(如pH、溫度、離子強度等)會發生沉澱的特性。常用的沉澱劑包括氨酒精、硫酸銨等。 2. 色譜法:色譜法是一種非常精確的蛋白質

  • • 在做SDS-PAGE時候怎麼算蛋白上樣量?

    確定上樣量的目標是使得電泳後的蛋白質條帶清晰可見,但又不至於過於集中導致條帶模糊。 首先,你需要知道你的樣品中蛋白質的濃度。這通常透過Bradford、BCA、Lowry等蛋白質濃度測定方法來實現。這些方法將提供一個蛋白質濃度的測量值,通常以微克/微升(µg/µl)為單位。一般來說,對於大

  • • SDS與蛋白質的結合機理是什麼?

    SDS與蛋白質的結合機理涉及疏水和電荷相互作用。SDS是一種陽離子表面活性劑,具有一個長的疏水碳氫尾部和一個帶負電荷的疏水硫酸鹽頭部。由於其兩親性質,SDS可以與許多生物分子相互作用,包括蛋白質。 SDS的疏水尾部可以與蛋白質的疏水氨基酸殘基相互作用,開啟其三維結構,變為線性或接近線性的結

  • • 蛋白做SDS-PAGE電泳,染色時發現,有一個樣本的泳道中間有條豎線,請問這是什麼原因導致的?

    一、樣本製備問題 1.蛋白濃度不均勻: 如果樣本中蛋白濃度不均勻,可能會在電泳過程中形成豎線。 2.雜質: 樣本中的雜質可能與染料反應,導致泳道中出現豎線。 二、電泳操作問題 1.凝膠製備: 凝膠中的氣泡或者不均勻的聚合可能導致泳道中的豎線。 2.電泳緩衝液: 緩衝液的組成不當或者

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