蛋白質電泳為什麼有向負極移動的?
蛋白質電泳中,蛋白質向負極還是正極移動取決於其在電泳緩衝液中的電荷。蛋白質的電荷是由其氨基酸殘基的電荷決定的,這些電荷在特定的pH下會變化。蛋白質的電荷與溶液的pH以及蛋白質的等電點 (pI) 有關。
等電點 (pI) 是指蛋白質淨電荷為零的pH值。在這個pH值以下,蛋白質的淨電荷為正;在這個pH值以上,蛋白質的淨電荷為負。
在傳統的蛋白質電泳(如Native-PAGE)中,如果電泳緩衝液的pH低於蛋白質的pI,那麼蛋白質會帶有正電荷並向負極遷移。相反,如果電泳緩衝液的pH高於蛋白質的pI,蛋白質會帶有負電荷並向正極遷移。
然而,在SDS-PAGE中,事情有所不同。SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) 是一種陰離子表面活性劑,它會與蛋白質結合並使其呈線性結構,並賦予蛋白質一個大致均一的負電荷。這種負電荷使得蛋白質在SDS-PAGE中的移動幾乎完全是基於其大小,而不是其原始電荷。由於SDS的存在,蛋白質總是帶有負電荷並向陽極(正極)遷移。
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