蛋白分析FAQ彙總

• • 做免疫熒光染色和WB條帶，不同蛋白的一抗有的用單克隆抗體，有的用多克隆抗體，這符合規範嗎？

  使用單克隆還是多克隆抗體並不是問題，而是一個實驗設計的選擇。不同的實驗目的和背景下，選擇不同型別的抗體是合理的。關鍵是你需要確保所使用的抗體是經過驗證的，並且在你的實驗條件下可以特異性地檢測到目標蛋白。 實驗中使用單克隆或多克隆抗體的考量： 1.如果你研究的蛋白存在不同的同種型或翻譯後修飾

• • Western實驗hif-1a蛋白怎麼才能敷出來？

  當進行 Western blot 實驗時，敷出目標蛋白（如 HIF-1α）需要經過以下步驟： 1.細胞培養和處理： 培養細胞：選擇適當的細胞系，如人類細胞系（HEK293、HeLa等）或小鼠細胞系（NIH/3T3等），並在合適的培養基中培養細胞。 處理細胞：根據實驗設計，處理細胞以誘導或

• • 大分子量（500kda）蛋白做westernblot怎麼做呢？

  處理大分子量（例如500 kDa）的蛋白進行Western Blot實驗時，可能需要調整一些實驗引數以確保蛋白能夠被有效地分離和檢測。如下所述： 1. 凝膠的選擇: 使用較低濃度的聚丙烯醯胺凝膠（例如4-8%）可以更好地分離大分子量的蛋白。 2. 電泳條件: 使用低電壓執行凝膠。這有助於

• • 請問如何製備磷酸質譜的樣品呢

  磷酸化蛋白的樣品製備對於後續的質譜分析是至關重要的，其大致步驟如下： 1. 蛋白提取: （1）使用適合的緩衝液從細胞或組織中提取總蛋白。 （2）為防止蛋白酶的活性，可加入蛋白酶抑制劑。 （3）為防止磷酸化位點在提取過程中喪失，使用磷酸酯酶抑制劑是很重要的。 2. 蛋白純化和濃縮: （1）

• • 你好，有沒有甲基化核磁分析方法

  蛋白質甲基化是一種常見的蛋白質翻譯後修飾，對於調控蛋白質的功能、穩定性和互作等方面都有著重要的影響。NMR可以為甲基化位點的鑑定、甲基化動態和蛋白質的甲基化狀態提供詳細資訊。利用NMR技術分析蛋白質甲基化的大致步驟如下： 1.樣品製備： 選擇合適的甲基化酶和供體，如SAM（S-腺苷甲硫氨酸

• • 蛋白組學分析中差異蛋白互相作用網路圖的分析，可以說明什麼問題呢？

  在蛋白組學分析中，差異蛋白互相作用網路圖的分析可以幫助我們理解蛋白質之間的相互作用關係，揭示生物體內的生物學過程和疾病發生機制。透過分析差異蛋白互相作用網路圖，我們可以得到以下資訊： 1.蛋白質相互作用網路的拓撲結構： 差異蛋白互相作用網路圖可以展示蛋白質之間的相互作用關係，包括直接的物理

• • 如何鑑定一個蛋白質是二聚體（有相同亞基的那種）？

  確認一個蛋白質是由相同亞基組成的二聚體（同源二聚體）可以透過多種方法： 一、質譜分析（Mass Spectrometry） 1.原理： 質譜分析可以精確地測量蛋白質或多肽的分子質量。 2.操作： 在解離條件下進行質譜分析，以確認單個亞基的質量。在非解離條件下進行質譜分析可以測量整個蛋白

• • 蛋白純化，為什麼純化的蛋白大小和預計的不符，預測的大小為107kd，跑膠出來卻是60kd？

  如果你純化的蛋白質在SDS-PAGE電泳後顯示的分子量遠小於預計值（例如，預計為107 kDa但實際顯示為60 kDa），可能有幾個原因： 1. 蛋白質降解 最常見的解釋是蛋白質在提取和純化過程中部分降解。這通常是由於蛋白酶的活性。確保在蛋白質提取和純化過程中新增適量的蛋白酶抑制劑，並儘量

• • 有知道蛋白質純化方法嗎？

  蛋白質純化的目的是獲得高純度的目標蛋白質，以便進行進一步的研究和應用，如研究其功能機制和三維結構。蛋白質純化的方法有多種，不同的純化方法原理和步驟都不同，詳細解釋如下： 一、離子交換色譜 (Ion-Exchange Chromatography) 1.原理 根據蛋白質表面帶電性與色譜柱上

• • 有沒有哪裏可以做高效液相色譜（含有紫外，示差，多重角光散色檢測器）？謝謝！？

  北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 簡稱BTP）成立於2015年，從事以生物質譜為依託的生物製品表徵，大分子物質（包括蛋白質、多肽、代謝物）質譜分析以及小分子物質檢測服務。 公司採用ISO9001質量控制