蛋白分析FAQ彙總

• • 有人純化過焦亡蛋白嗎，按照參考文獻一直沒有表達純化出來，求純化蛋白的高手指教一下？

  焦亡蛋白（也稱為焦亡因子）是一種與細胞凋亡（程式性細胞死亡）相關的蛋白質。純化焦亡蛋白是一個具有挑戰性的任務，因為它是一種低丰度的蛋白質，存在於複雜的細胞混合物中。如果你在嘗試表達和純化焦亡蛋白時遇到問題，可能有以下幾種原因： 1.載體和宿主不匹配： 使用的表達載體或宿主可能不適用於你的目

• • 各位大神，質譜什麼情況下測得相對分子量可能較大呢？

  質譜測得的相對分子量（或稱為質量/荷比）較大可能是由多種因素造成的。以下列舉了一些可能的情況： 一、非共價修飾和結合 1.磷酸化、糖基化等： 蛋白質或其他生物大分子可能會經歷磷酸化、糖基化或其他種類的修飾，這些都會增加其相對分子量。 2.金屬離子結合： 某些蛋白質可能與金屬離子（如Ca

• • 大家好，最近學習質譜儀，小白一個，想請問為什麼ESI離子源，得到的質譜圖準分子離子峰是〔M+H〕+?

  電噴霧電離（Electrospray Ionization，簡稱 ESI）是一種常用的軟電離技術，廣泛應用於生物大分子（如蛋白質、多肽、核酸等）的質譜分析。在 ESI 的過程中，樣品溶液透過一個帶電的噴嘴（噴霧針）形成微小的液滴，然後在高電壓的作用下進行電離。 為什麼是〔M+H〕⁺？ 1

• • 相對分子質量的測定——質譜法中最大質荷比為什麼是相對分子質量?

  在質譜法中，最大質荷比（m/z）是指質譜圖中離子峰的質量與電荷比值的最大值。而為什麼在相對分子質量的測定中，最大質荷比是相對分子質量呢？下面我將逐步解答這個問題。 1.質譜法的基本原理 質譜法是一種透過將化合物分子轉化為離子，並對離子進行質量分析的方法。在質譜儀中，化合物樣品首先被電離，產

• • 打高分辨質譜，濃度要求是多少？

  樣品濃度對高分辨質譜的質量有一定影響，但並沒有嚴格的“一刀切”標準，因為這還取決於多個因素： 1.分析物的性質： 某些化合物或蛋白質更容易被電離，因此可能需要較低的濃度。 2.質譜儀的靈敏度和規格： 不同型號的質譜儀對樣品濃度的要求也會不同。 3.實驗目的： 例如，定量實驗通常需要較高

• • 求助懂質譜MRM的人 ?

  一、MRM是什麼？ MRM（Multiple Reaction Monitoring）是質譜技術中的一種定量分析方法，也稱為多反應監測。它透過選擇特定的前體離子和產物離子對，實現對目標分子的高靈敏度和高選擇性的定量分析。 二、MRM的原理是什麼？ MRM基於質譜儀的三重四極杆（trip

• • 分子量檢測的分析方法有哪些？

  分子量（Molecular Weight, MW）檢測是化學、生物化學和分子生物學研究中常用的分析手段。根據所研究物質的性質和需要解決的問題，可以使用多種不同的分析方法： 1.質譜法（Mass Spectrometry）： 質譜法是一種常用的分子量檢測方法，它可以透過測量樣品分子的質荷比（

• • 多肽的等電點如何計算？

  計算多肽等電點的大致步驟如下： 1.確定多肽的氨基酸組成： 首先，需要確定多肽由哪些氨基酸組成。每種氨基酸都有不同的酸鹼性質，這將影響多肽的等電點。 2.確定每個氨基酸的pKa值： 每個氨基酸都有一個特定的pKa值，它表示在酸性條件下，氨基酸中的羧基和氨基的離子化程度。這些pKa值可以從

• • 測定蛋白質等電點的意義是什麼？

  蛋白質的等電點（isoelectric point，pI）是指在特定條件下，蛋白質呈現淨電荷為零的pH值。測定蛋白質的等電點具有以下重要意義： 1.確定蛋白質的電荷狀態： 蛋白質的電荷狀態對其溶解性、穩定性、相互作用以及功能等方面具有重要影響。蛋白質在不同pH值下的電荷狀態決定了其溶解度和

• • 在蛋白質免疫印跡實驗中為什麼要用一抗檢測目的蛋白後又用二抗進行放射自顯影顯示?

  在回答這個問題前，我們先說一說蛋白質免疫印跡實驗的原理： 首先，目的蛋白會被分離出來並轉移到膜上。 然後，膜上的目的蛋白會與特異性的一抗結合。 接下來，一抗與目的蛋白結合的位置會被二抗識別並與之結合。 最後，二抗上的酶或放射性同位素會產生視覺化的訊號，用於檢測目的蛋白的存在與否。 1.