蛋白分析FAQ彙總

• • 測蛋白質結構x衍射準還是核磁共振準？

  X射線衍射和核磁共振是蛋白質結構研究中的常用方法，它們各有優缺點，準確性方面兩者都能達到很高的標準，但適用的情況不同： 一、X射線衍射： X射線衍射是一種常用的測定蛋白質結構的方法。它透過將蛋白質晶體暴露在X射線束中，利用晶體對X射線的衍射來確定蛋白質的結構。 1.優點： 可以解析非常

• • 蛋白質sds聚丙烯醯胺凝膠電泳及分子量測定實驗如何選擇最佳凝膠濃度與緩衝液的pH？

  1.凝膠濃度的選擇： 凝膠濃度的選擇應該根據待測蛋白質的分子量範圍來確定。一般來說，較低的凝膠濃度適用於較大分子量的蛋白質，而較高的凝膠濃度適用於較小分子量的蛋白質。 通常，常用的凝膠濃度範圍是8-15%。對於較大分子量的蛋白質，可以選擇較低的凝膠濃度，如8%。對於較小分子量的蛋白質，可以

• • 為什麼SDS聚丙烯醯胺凝膠電泳可以用於提純蛋白質?

  SDS-PAGE電泳是一種常用的蛋白質分離和純化技術。它的原理是利用SDS（十二烷基硫酸鈉）和聚丙烯醯胺凝膠的特性，將蛋白質樣品分離成不同大小的帶狀條帶，從而實現蛋白質的純化。 1.SDS的作用： SDS是一種表面活性劑，它能夠與蛋白質分子中的氫鍵和疏水相互作用，使蛋白質分子展開成線性結構

• • 免疫共沉澱使用的蛋白必須含有標籤（Flag、HA）嗎？

  在免疫共沉澱（immunoprecipitation）實驗中，通常需要使用特定的抗體來識別和富集目標蛋白。這些抗體可以與目標蛋白結合，並透過沉澱的方式將目標蛋白與其結合的蛋白一起富集出來。在某些情況下，爲了更好地進行免疫共沉澱實驗，目標蛋白可能需要含有特定的標籤，如Flag標籤或HA標籤。

• • SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳測定蛋白質分子量時，遷移距離如何測量？

  SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳（SDS-PAGE）是常用的分析蛋白質大小（分子量）的方法。在SDS-PAGE實驗後，可以透過測量蛋白質在凝膠中的遷移距離來估算它們的分子量。 使用影象分析軟體（例如ImageJ或其他分析軟體）或標尺來測量蛋白質遷移的距離，即從點樣孔到蛋白質帶狀條紋的距離。 如

• • 質譜法測相對分子質量，分子離子與碎片離子質荷比的最大值就是相對分子質量。求解詳細原理分析

  利用質譜法（Mass Spectrometry, MS）測定相對分子質量時，通常觀察到的是分子離子和各種碎片離子的質荷比（m/z）。分子離子是指分子失去或獲得一個電子（不失去或分離出其它原子或原子團）而形成的離子。 在質譜圖中，分子離子的m/z值（在正離子模式下）通常代表了分析物的相對分子

• • 分子量大於2k的如何用質譜檢測？

  當分子量大於2k的蛋白質需要進行質譜檢測時，可以採用以下幾種方法： 1. 電噴霧離子化（ESI, Electrospray Ionization）: 原理: 樣品溶液透過高電壓的噴嘴噴出，形成含有帶電的微小液滴，經過蒸發和離子/分子排斥，最終生成帶電分子。 適用範圍: 適用於大多數生物大

• • 請問高分子分子量分佈的測定方法是什麼？

  高分子分子量分佈是指在一定條件下，高分子樣品中不同分子量的分子所佔的比例。測定高分子分子量分佈對於瞭解高分子材料的結構和性質具有重要意義。以下是幾種常見的測定高分子分子量分佈的方法： 1.凝膠滲透色譜法（GPC/SEC）： 凝膠滲透色譜法是最常用的測定高分子分子量分佈的方法。該方法基於高分

• • western blot蛋白跑到maker因為什麼？

  當進行Western blot實驗時，蛋白質在電泳過程中會被分離並轉移到膜上，然後透過特定的抗體與目標蛋白結合，形成特定的蛋白帶。然而，有時候我們可能會觀察到蛋白質在Western blot過程中跑偏或者出現多個帶的情況。以下是一些可能導致這種情況發生的原因： 1.電泳條件不當： 電泳電壓

• • 跑蛋白質電泳，配置樣品時，往蛋白質加入了一種藍色的液體，說是能使蛋白變性了順便觀察電泳進度，液體是啥?

  在蛋白質電泳實驗中，通常會使用一種稱為蛋白質載入緩衝液（protein loading buffer）的溶液來配置樣品。這種緩衝液通常是一種含有蛋白質變性劑、還原劑和染料的液體，蛋白質變性劑和還原劑的主要作用是將蛋白質樣品進行變性處理，使其在電泳過程中具有一定的線性形狀，便於在凝膠中遷移。染