蛋白分析FAQ彙總
-
• 蛋白電泳時，為什麼經濃縮膠壓成一條線後，達到分離膠後會再次變寬？
在SDS-PAGE電泳過程中，蛋白質樣品首先被載入到濃縮膠（或叫堆疊膠）上，然後穿越濃縮膠進入分離膠（或叫分辨膠）。這兩種膠的作用和性質都不同： 1.濃縮膠（堆疊膠）： 它的聚丙烯醯胺濃度較低，孔隙大小較大。蛋白在此膠中不是按分子量分離的，而是主要爲了使所有的蛋白質集中到一個相對狹窄的區域
-
在SDS-PAGE電泳後，如果你希望從膠塊中回收某一特定的蛋白條帶，可以透過以下步驟進行純化： 1.膠片染色和去色： 首先，將整個電泳膠用適當的染料（如考馬斯亮藍）進行染色。 經過一定時間後，用去色液去色，直至所需的蛋白條帶清晰可見。 2.切割膠塊： 使用乾淨、鋒利的刀片或剪刀，沿著
-
SDS-PAGE的分離能力取決於幾個因素，特別是聚丙烯醯胺凝膠的濃度。不同的凝膠濃度對於不同大小的蛋白具有最佳的解析度。一般來說： 1.低濃度的凝膠（如4%-8%）適用於大蛋白質（>100 kDa）的分離。 2.中等濃度的凝膠（如10%-12%）可以分離中等大小的蛋白質（約25-100
-
豎直電泳（即在垂直方向上進行的SDS-PAGE）是蛋白質電泳的常用形式，其選擇與以下因素有關： 1.分離效率： 豎直電泳提供了良好的分離效率和解析度。隨著蛋白質在凝膠中遷移，它們會在垂直方向上分離，從而使得在短時間內視覺化多個不同大小的蛋白。 2.多樣品同時載入：
-
蛋白質電泳時出現的歪曲或斜線通常是由多種因素導致的。以下是一些常見的原因及其可能的解決方案： 1.不均勻的電場： 如果電場在凝膠間不均勻，可能導致蛋白質在凝膠中遷移不均勻。確保電極之間的連線良好，並檢查是否有任何破損。 2.凝膠的不均勻性： 如果凝膠製備不均勻或出現氣泡，可能導致蛋白的遷
-
要比較7種細胞中所表達的蛋白質的差異，你可以採用以下方法： 1.二維電泳 (2-DE): 使用二維電泳可以將細胞的蛋白質按照等電點和分子量進行分離。不同細胞型別的2-DE圖譜會展現出不同的蛋白質斑點模式。透過對比這些圖譜，你可以觀察到哪些蛋白質在某些細胞中表達而在其他細胞中不表達。 2.
-
對於蛋白質組篩選出的大量差異蛋白，可以進行以下幾種後續研究： 1.功能鑑定： 對差異蛋白的生物學功能進行深入研究，如其在細胞中的作用、調控網路等。 2.疾病相關性研究： 探討差異蛋白在特定疾病或生理過程中的角色。例如，某些差異蛋白可能與某種疾病的發病機制、預後或治療響應性有關。 3.結
-
蛋白質的種屬差異是指不同物種或種羣之間，蛋白質的序列、結構和功能上的差異。這種差異源於生物的進化過程，反映了不同物種的進化關係和它們對特定環境適應的策略。 1. 蛋白質序列的種屬差異： 每一個物種都有其特有的基因組，這些基因編碼的蛋白質在序列上往往與其他物種存在差異。透過比較蛋白質的氨基酸
-
• Western Blotting的實驗原理和實驗步驟，它和ELISA的區別？在蛋白質測定上什麼情況選用什麼方法？
一、Western Blotting 1.實驗原理： Western Blotting（Western印跡）是用於檢測特定蛋白在樣品中的存在及其表達量的技術。其基本原理是先用SDS-PAGE電泳分離蛋白，然後將蛋白轉移到膜上（如：聚偏氟乙烯膜），再使用特異性的抗體來檢測目標蛋白。 2.實
-
表徵一個細胞上有特定的受體蛋白主要目的是驗證和量化細胞表面或內部的受體蛋白的存在。下面是一些常用的表徵方法： 1.流式細胞術 (Flow Cytometry) 使用特異性抗體標記目標受體，並用流式細胞儀檢測和分析細胞中受體的表達水平和細胞數量。 2.免疫熒光/免疫組化 利用特異性抗體和熒
How to order?
