為什麼蛋白質電泳要豎直電泳?
豎直電泳(即在垂直方向上進行的SDS-PAGE)是蛋白質電泳的常用形式,其選擇與以下因素有關:
1.分離效率:
豎直電泳提供了良好的分離效率和解析度。隨著蛋白質在凝膠中遷移,它們會在垂直方向上分離,從而使得在短時間內視覺化多個不同大小的蛋白。
2.多樣品同時載入:
豎直凝膠的設計允許在凝膠的頂部沿整個寬度載入多個樣品。這使得研究者可以一次性分析多個樣品,提高實驗的吞吐量。
3.均勻的電場:
在豎直電泳的裝置中,電場在整個凝膠中都是均勻的,這有助於確保所有樣品以相同的方式遷移,從而得到一致且可重複的結果。
4.厚度:
豎直凝膠通常比水平凝膠薄,這有助於加快電泳速度和提高解析度。
5.濃縮膠和分離膠的組合:
在豎直電泳中,可以很容易地在同一個凝膠中組合兩種不同濃度的聚丙烯醯胺:一個用於濃縮蛋白(濃縮膠),另一個用於分離蛋白(分離膠)。這種組合提供了更好的蛋白質解析度。
6.減少擴散:
由於豎直電泳的時間較短,蛋白的側向擴散較小,這有助於保持清晰的蛋白條帶。
儘管豎直電泳具有上述優點,但也有一些其他型別的電泳,例如二維電泳,它結合了水平和豎直電泳,以在兩個維度上分離蛋白質,進一步提高分析的深度和解析度。但對於大多數常規的蛋白質分析,豎直SDS-PAGE仍然是首選。
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