蛋白分析FAQ彙總

• • 什麼是2D-Gel電泳？

  二維凝膠電泳（通常稱為2D-Gel電泳）根據蛋白質的等電點和分子量分離蛋白質。透過使用這種技術可以提高蛋白質分離解析度。在2D-Gel電泳中，蛋白質首先在設定的pH梯度上移動。然後使用聚丙烯醯胺凝膠電泳以垂直或水平模式劃分蛋白質。因此，在第二個維度中，蛋白質根據其分子量進行分離。此外，透過使

• • 1D-Gel與2D-Gel之間的區別？

  1D-Gel：利用聚丙烯醯胺凝膠電泳基於分子量差異分離蛋白質；解析度低，價格相對便宜。2D-Gel：結合等電聚焦和SDS-PAGE基於蛋白質的等電點和分子量差異分離蛋白質；解析度高，價格相對昂貴。相關服務:凝膠及影象分析

• • 凝膠電泳和SDS-PAGE有什麼區別？

  SDS-PAGE是凝膠電泳的一種，二者的主要區別在於，SDS-PAGE主要用於分離蛋白質，但凝膠電泳可用於分離DNA、RNA和蛋白質。SDS-PAGE通常提供比傳統凝膠電泳更高的解析度。相關服務:凝膠及影象分析

• • 進行質譜分析的蛋白質樣品可以以什麼形式寄送？

  蛋白質樣品可以以固體、液體或溶液形式寄送。相關服務:蛋白質質譜鑑定

• • 蛋白質譜分析—如何處理需要特殊儲存或處理的樣品？

  1.光敏性：對光敏感的樣品可以放在用鋁箔包裹的小瓶中。2.低溫儲存：如果樣品需要儲存在低溫（冷藏或冷凍）下，請將其放在冰箱。3.空氣敏感：對空氣敏感或快速分解的樣品需要特別注意。4.酸/鹼敏感：如果向樣品中加入酸或鹼，某些樣品會降解。如果您寄送的樣品對酸對鹼敏感，請務必註明。相關服務:蛋白質

• • 蛋白質譜分析—我需要提交多少樣品？

  所需的樣品量取決於要執行的質譜服務型別。一般來說，1mL 10ppm樣品或1mg固體形式足以滿足所有型別的需求。相關服務:蛋白質質譜鑑定

• • 蛋白質譜分析—可以使用哪些溶劑？

  水、甲醇、乙腈、氯仿、四氫呋喃和二氯甲烷等溶劑通常被接受用於MS分析。應避免使用DMSO和DMF等高粘度樣品。樣品也可以在MS相容的緩衝液中提交，用於電噴霧（ESI）或MALDI分析。這些緩衝液包括濃度為10mM或更低的乙酸銨、甲酸銨和碳酸氫銨。與MS相容的酸性新增劑包括乙酸、甲酸和三氟乙酸

• • 什麼是“離子源”？

  一個分子要透過質譜儀進行分析，必須被轉化為離子。這是在離子源中完成的。離子源有多種型別，但對於肽、蛋白質和寡核苷酸等生物樣品最有用的離子源是基質輔助鐳射解吸電離（MALDI）和電噴霧電離（ESI）。在 MALDI 下，生物分子溶解在含有基質的溶液中，然後沉積在目標板上並被幹燥。用鐳射照射含有

• • 區分兩個約 100 KD 的蛋白質所需的最小質量差是多少？

  分辨兩個 100 kD 蛋白質的最大限制是同位素分佈的寬度，其在 100 kD 處約為 50 個質量單位寬（Yergey, J., Heller, D., Hansen, G., Cotter, R. J., and Fenselau, C., Anal. Chem.1983, 55, 35

• • 什麼是中性丟失？

  該表達是指分子中不帶電荷的片段的丟失。一般來說，中性分子是乙酸、磷酸或其他一些低分子量分子。當乙醯基或磷酸基團從完整分子的某個位置獲取一個氫時，形成中性分子。這個過程發生在碰撞池中（也可能發生在噴嘴分離器區域（噴霧進入離子源的地方））。98 (H3PO4) 的中性丟失可用於檢測磷酸化多肽，因