蛋白分析FAQ彙總

• • 什麼是四極質譜儀？

  一個四極質譜儀由四個平行杆組成，其方向類似於羅盤上的四個極。南北對的射頻和直流電壓是一個極性，東西對的射頻和直流電壓是相反的極性。六極杆和八極杆相似，但分別有六根和八根杆。它們被用作碰撞和/或儲存單元。在串聯質譜儀（例如三重四極杆或 Q-Tofs）中，四極杆可用作一個質譜儀或一種離子傳輸模式

• • 2000的分辨能力是什麼意思？

  在最簡單的形式中，它意味著可以區分質量數為 2000 的峰和質量數為 2001 的峰。解析度有更正式的定義，即 M/Dm，其中 M 是測量解析度的質量，而 Dm 是兩個等量級峰之間的質量差，其中峰之間的谷值為 10%。質量分辨能力是針對單個峰定義的，其中 Dm 是峰高 50% 處的峰全寬（即

• • 差異凝膠電泳2D DIGE 進行定量蛋白質組學分析需要進行技術複製嗎？

  差異凝膠電泳2D DIGE 進行定量蛋白質組學分析，可以不進行技術重複。相關服務:二維凝膠電泳服務

• • 除了 N-和 O-糖基化，生物治療藥物最突出的 PTMs 是什麼？

  大多數蛋白質對甲硫氨酸的氧化很敏感，在極少數情況下對色氨酸或組氨酸的氧化也很敏感。天冬醯胺的脫醯胺和谷氨醯胺較低程度的脫醯胺，以及脯氨酸和賴氨酸的羥基化經常出現。進一步的修飾是加二硫鍵、糖基化、磷酸化、硫酸化和末端截短。相關服務:翻譯後修飾蛋白組分析

• • 序列驗證需要多少材料？

  我們通常建議用 75 µg 進行 3 種不同的蛋白酶消化，以實現 100% 的序列覆蓋。但根據您的蛋白質，每次 25 µg 的一到兩次的消化物就足夠了。相關服務:序列分析

• • 什麼是 SDS-PAGE 凝膠？什麼是還原條件與非還原條件？

  SDS-PAGE（sodium dodecyl sulfate – polyacrylamide gel electrophoresis）是一種按質量分離蛋白質的方法。SDS 是一種離子型去汙劑，可以變性並結合蛋白質，使蛋白質帶上均勻的負電荷。這意味著當向聚丙烯醯胺凝膠施加電流時，與 SDS

• • 分析型反相色譜顯示什麼？

  分析型反相色譜用於評估蛋白質純度和結構均一性。均一性透過多個峰的缺失和主峰的對稱性來判斷。在這些痕跡中尋找一個尖峰；這表明樣品中存在單一物種而沒有汙染。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）

• • 為什麼預染蛋白標記物的表觀分子量值在不同凝膠型別中不同？

  當蛋白質與帶電荷的染料分子共價結合時，會影響蛋白質的總電荷。改變蛋白質的電荷很可能會改變它在凝膠中的流動性。這就解釋了為什麼預染色的蛋白質標記被賦予“表觀”分子量值，而常規未染色的蛋白質標記被賦予真實分子量。數據卡和其他參考文獻上預染色蛋白標記物的表觀分子量狀態是用 10-20% Tris-

• • 是否需要對蛋白質樣品進行去糖基化以進行蛋白質組學分析？

  如果蛋白質被糖基化，任何給定的片段都將作為糖型的集合存在，因為相同的肽帶有多種聚糖結構。蛋白質組學分析軟體通常不是為處理出現的無數可能性而設計的，因此片段將無法識別。這就是在進行這些實驗之前通常建議進行去糖基化的原因。相關服務:組學分析

• • 蛋白質測序和核酸測序有什麼區別？

  對於蛋白質測序，Edman測序和質譜測序方法都透過化學反應或高能碰撞和共價鍵而破壞蛋白質的化學鍵分析氨基酸殘基序列。核酸測序是基於DNA複製的原理，利用DNA酶重新合成新的鏈，而不破壞母鏈。在這個過程中，新鏈的合成被隨機打斷，新的核苷酸被合成和吸收，從而確定母鏈的相應序列。相關服務:序列分析