蛋白質譜分析—可以使用哪些溶劑?

    水、甲醇、乙腈、氯仿、四氫呋喃和二氯甲烷等溶劑通常被接受用於MS分析。應避免使用DMSO和DMF等高粘度樣品。樣品也可以在MS相容的緩衝液中提交,用於電噴霧(ESI)或MALDI分析。這些緩衝液包括濃度為10mM或更低的乙酸銨、甲酸銨和碳酸氫銨。與MS相容的酸性新增劑包括乙酸、甲酸和三氟乙酸 (TFA)。避免使用鹽、磷酸鹽、HEPES、檸檬酸鹽或硫酸鹽緩衝液、洗滌劑(吐溫、Triton、NP-40、SDS)、尿素、甘油、碳水化合物、EDTA、GnHCl、塑膠和增塑劑、聚乙二醇 (PEG) 或其他聚合物,因為這些成分會干擾分析物的電離。對於GC-MS分析來說——樣品濃度和量:1 mg純固體、液體或油樣品樣品足夠。溶液樣品中含有的緩衝液應適合GC-MS分析,樣品不超過1mg/mL。溶劑:GC-MS需要揮發性有機溶劑,如二氯甲烷、己烷、甲醇、乙醚等。GC-MS不能直接分析溶解在水中的樣品。注意:某些類別的化合物不適合進行GC-MS分析,包括強酸、強鹼、鹽、水、金屬或聚合材料。還應避免使用塑膠小瓶和石蠟膜。對於ESI分析來說——樣品濃度和量:純固體、液體或油樣品至少需要0.1mg。溶液中含有的緩衝液應適用於ESI分析,建議提供濃度為50-100μM的樣品1.5mL,但也可以用低至100μL的溶液進行分析。溶劑:適用於ESI的溶劑包括甲醇、乙腈以及水、活性劑或甲醇的混合物。注意事項同GC-MS。對MALDI分析來說——樣品濃度和量:取決於分析物的質量。對於500-2000Da的純固體、液體或油樣品,通常0.1mg就足夠了。對於更高質量的樣品,可能需要更多的樣品量,具體取決於樣品的質量,純度和型別。應提供至少5μL的溶液,濃度至少為100μM。溶劑:合適的溶劑包括水、甲醇、二氯甲烷、乙腈等。避免:注意事項同GC-MS。


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