蛋白分析FAQ彙總

• • 蛋白質測序對蛋白質活性有什麼要求嗎？

  蛋白質測序不需要維持蛋白質活性，因為不需要研究蛋白質功能。目前可用的蛋白質測序方法包括Edman降解測序和質譜測序。Edman測序方法需要高純度的蛋白質，且只需幾微克的蛋白質就足以進行測序。Edman測序只能對蛋白質的N端進行測序，因為Edman測序是基於降解蛋白質的N端然後對其進行鑑定。E

• • SDS蛋白條帶即使很窄也能用來鑑定蛋白質嗎？

  一般來說，對於考馬斯亮藍和 SYPRO Ruby 染色的蛋白條帶，肉眼可見的蛋白條帶足以進行測序。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定

• • 如果切割的 SDS 蛋白質條帶可能包含多個蛋白質條帶怎麼辦？

  如果切割的蛋白條帶包含多條蛋白條帶，也可以進行蛋白鑑定，以及透過資料比對推斷蛋白的序列。事實上，大多數從 SDS-PAGE 凝膠上剝離的蛋白質都含有多種蛋白質。這些複雜蛋白質的鑑定可以透過色譜-質譜串聯鑑定方法進行。複雜的蛋白質先透過色譜分離，再透過質譜，分析可以達到更高的準確性。相關服務:

• • HPLC—流動相緩衝液應如何製備？

  流動相緩衝液基本上可以透過兩種方式製備：1、在與有機改良劑混合之前調節pH。2、在pH調節之前混合緩衝液和有機改良劑。雖然pH值在水性體系中是一個很好定義的引數，但在部分有機溶劑體系中定義或測量質子濃度並不是那麼簡單。因此建議製備水性緩衝液，調節其pH值，然後與有機改良劑混合。應注意以下幾點

• • HPLC—導致保留時間可重複性較差的原因及解決辦法是什麼？

  1.流動相組成：大多數可重複的結果都是透過稱量流動相混合物獲得的。對於水/乙醇，將30/70（v/v）300克（300毫升x1克/毫升）水與546克（700毫升x0.78克/毫升）乙醇混合。特別是當使用醇類作為極性改良劑時，應避免在HPLC泵中進行混合，因為組分的粘度變化很大，不利於混合。流

• • 什麼是“精確質量”，它為什麼有用？

  精確質量可用於確認潛在化療藥物化學合成可能產生的合理小分子（即小於<1000 Da）的元素組成（即碳、氫、氮等的數量） . 在這種情況下，透過將化合物中預期存在的所有元素質量相加來計算理論“精確質量”。然後將計算得的質量與實驗測得的質量進行比較，以確定它們是否符合預期的 Micro Q-To

• • 圓二色譜測蛋白Tm值（熔解溫度）時候曲線很奇怪，中間多了一個尖峰，不知道您有遇到過這種情況嗎？不方便的話那就打擾您了

    在測量蛋白質的熔解溫度（Tm值）時，如果在圓二色譜（CD）曲線上出現奇怪的尖峰，可能有以下幾種原因：   1.蛋白質異構：蛋白質樣品中可能存在多種異構形式，這些異構體可能有不同的熔解溫度。在測量過程中，當一個異構體開始熔解時，可能會出現尖峰。   2.蛋白質聚集：在加熱過程中，蛋白質可能

• • 磷酸化定量蛋白組學研究：想請您們提供思維路線，我要研究的基因是編碼一個磷酸酶調節亞基，我不知道如何做探討和癲癇的關係

  您好！針對您提到的編碼磷酸酶調節亞基的基因與癲癇關係的研究，可以參考以下思維路線：   1.文獻調研：首先，您需要對磷酸酶調節亞基的生物學功能和癲癇病理生理進行深入瞭解。透過查閱相關文獻，找出已知的磷酸酶調節亞基在神經系統中的作用，以及癲癇病理生理機制的研究進展。   2.提出假設：基於文獻

• • 蛋白質指紋圖譜是什麼？

  蛋白質指紋圖譜（Protein Fingerprinting）是一種透過對蛋白質進行酶切或化學切割，產生特定的肽段模式，然後透過質譜或電泳技術進行檢測和分析的方法。蛋白質指紋圖譜提供了蛋白質或肽段的質譜圖譜，這些圖譜反映了蛋白質的氨基酸組成、分子量、氨基酸修飾等資訊。透過比較蛋白質指紋圖譜，

• • GC-MS跑標樣，只有溶劑峰沒有待測物峰，是為什麼呢？

  在GC-MS分析標樣時，如果只有溶劑峰而沒有待測物峰，可能有以下原因： 1、樣品處理問題：檢查樣品處理過程是否正確。可能在製備標樣時出現了操作失誤，例如未將待測物新增到溶劑中或新增的量過少。 2、注射器問題：確保注射器無損壞、堵塞或殘留汙染物。注射器問題可能導致樣