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• Edman 降解法:蛋白質和小肽的N-末端氨基酸序列測定技術
Edman 降解法是一種用於確定小肽和蛋白質的N-末端氨基酸序列的方法。這種方法是基於週期性地移除肽鏈N-末端的氨基酸並檢測該氨基酸的身份。這個過程可以重複進行,從而連續地確定多個氨基酸的順序。 Edman降解的大致步驟如下: 1.肽鍵選擇性標記: 首先,樣品與Edman試劑(酚酞異硫氰
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抗體測序(antibody sequencing)主要分析抗體的氨基酸序列,包括變數(V)區和恆定(C)區的精確測定。變數區通常是研究的重點,因為它包含著抗體與抗原特異性結合的補體決定區域(CDR),這些資訊有助於深入理解免疫應答,以及抗體如何透過特異性地識別和結合抗原來執行其功能。 一、
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質譜分析是一種分析技術,透過測量分子離子的質量來確定化合物的組成和結構。在生物化學和蛋白質組學中,質譜技術已成為分析多肽和蛋白質的主要方法之一。 一、多肽的質譜分析: 1.電噴霧電離 (ESI) 和 基質輔助鐳射解吸/電離 (MALDI): 這是兩種常用的離子化技術,它們可以將蛋白質或多
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多肽序列測定是確定多肽或蛋白質中氨基酸的確切排列順序的過程。這個過程對於蛋白質功能研究、疾病機制分析、藥物設計等領域都至關重要。 一、多肽序列測定技術 1.Edman 降解法: 透過逐步去除多肽N端的氨基酸並測量釋放的每一個氨基酸來確定序列,一次測定一個氨基酸,適用於短的多肽序列。
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蛋白質氨基酸序列分析是生物資訊學和分子生物學的關鍵領域。透過理解蛋白質的序列,我們可以預測其三維結構、功能以及與其它分子的相互作用。下面我們將深入探討蛋白質氨基酸序列分析:從序列到功能的全過程。 圖1 一、蛋白質氨基酸序列的獲取 在實驗室中,可以使用各種技術,如質譜分析,從生物樣品中
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FT-IR(傅立葉變換紅外光譜)分析是一種廣泛用於鑑定化學物質和研究分子結構的技術。它基於不同化學鍵和功能團對紅外輻射的特異性吸收。 圖1 一、工作原理: 1、當分子被紅外輻射照射時,它們會吸收特定波長的輻射,從而導致分子內部的化學鍵振動。吸收的輻射波長與分子內部化學鍵的型別和環境有
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HCP(Host Cell Proteins,宿主細胞蛋白)是指生物製品生產過程中,來自生產用細胞的蛋白質雜質。例如,當使用哺乳動物細胞(如CHO細胞)生產重組蛋白時,除了目標蛋白外,還可能有一些CHO細胞本身的蛋白存在於最終產品中。這些HCP可能會影響產品的穩定性、效力或安全性,因此需要進
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圓二色譜(Circular Dichroism, 簡稱CD)是一種研究蛋白質、核酸和其他生物大分子的二級結構和三級結構的技術。透過測量分子在特定波長下的旋光性,可以獲得有關其結構的資訊。 圖1 賴氨酸(Lys)本身的旋光性主要出現在遠紫外區的圓二色譜中。對於單一的賴氨酸或簡單的賴氨酸肽
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Q-TOF(Quadrupole-Time of Flight)質譜儀是一種集四極杆和飛行時間質譜(TOF)兩種技術於一身的質譜裝置。其結合了四極杆質譜的選擇性離子傳輸和飛行時間質譜的高解析度、高精度測量能力,常用於肽的質譜分析,尤其是蛋白質鑑定和蛋白質組學研究中。Q-TOF質譜對肽段的測定
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氨基酸的等電點(Isoelectric Point,pI)是指氨基酸分子在某一特定的pH值下,其淨電荷為零的狀態。計算氨基酸等電點的基本方法涉及到考慮氨基酸分子中各官能團(例如,氨基和羧基)的pKa值(酸解離常數的負對數值),並使用這些值來找到在這些官能團全部或部分被質子化的pH範圍中,氨基
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