多肽序列測定的技術與應用
- 肽質譜測序：透過生成多肽的碎片並測量它們的質量來確定氨基酸的序列。
- 肽圖分析：消化蛋白質產生肽段，然後透過測量肽段的質量並與資料庫比對來識別蛋白質。
- MS/MS或串聯質譜：一種用於獲得多肽內部碎片的質量資訊的技術，從而推斷氨基酸序列。
多肽序列測定是確定多肽或蛋白質中氨基酸的確切排列順序的過程。這個過程對於蛋白質功能研究、疾病機制分析、藥物設計等領域都至關重要。
一、多肽序列測定技術
1.Edman 降解法：
透過逐步去除多肽N端的氨基酸並測量釋放的每一個氨基酸來確定序列，一次測定一個氨基酸，適用於短的多肽序列。
圖1
2.質譜測序：
圖2
3.DNA 序列推導：
透過測定編碼目標蛋白質的基因的DNA序列，然後透過轉錄和翻譯的資訊來推導蛋白質的氨基酸序列。
二、多肽測序應用：
1. 蛋白質鑑定和特性研究
透過多肽序列的確定，研究蛋白質的生物功能、結構和亞型。
2. 抗原多肽設計
利用多肽序列資訊，可以設計合成多肽作為實驗研究的抗原，用於抗體的生產。
3. 蛋白質工程和藥物設計
確定並修改蛋白質或酶的活性位點，最佳化其功能或特性。
4. 疾病研究和生物標記物的鑑定
分析疾病相關蛋白的多肽序列，用於疾病機制的研究和生物標記物的鑑定。
5. 表達產物驗證
在基因克隆、表達蛋白質生產過程中，用於驗證目標蛋白質的序列和正確表達。
6. 研究蛋白質間的相互作用
分析蛋白質亞單元之間的互動，探討蛋白質複合物的組裝機制。
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