蛋白分析FAQ彙總
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詳細描述了從純化SUMO融合蛋白到使用SENP酶去除SUMO標籤的整個過程,並提供了去除標籤後的驗證方法。
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• 請問coip樣品後續想要質譜分析應該用什麼洗脫液進行beads的洗脫
爲了進行CoIP後的質譜分析,本文介紹了幾種常用的從beads上洗脫蛋白的方法,並提供了注意事項以確保洗脫效果和質譜分析的質量。
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• 可以分享一下蛋白鑑定的資料結果及分析方法嗎?如果鑑定出幾十種蛋白,該以哪個值為參考得出最優結果呢?
介紹了蛋白質鑑定的常見資料結果,包括肽段質譜、碎片質譜、蛋白ID及覆蓋率和置信度分數。同時,對如何分析這些資料,如資料庫匹配、假陽性率估計和定量分析方法等進行了闡述。最後,介紹瞭如何選擇最優結果的參考值。
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• CD檢測溶液可以是有機溶劑?0.01M磷酸鹽緩衝液製劑用流動相提取色譜峰正常,但用上述緩衝分裂,相關吸收波長下製劑組峰分叉為什麼
探討了在CD檢測中使用磷酸鹽緩衝液時,液相色譜峰出現分裂現象的情況。討論了溶液的要求、使用有機溶劑的注意事項,以及色譜峰分裂的可能原因,如溶液的pH、離子強度和有機成分的影響。
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1.樣品準備:首先需要提取或製備包含目標蛋白質的樣品。在研究蛋白質相互作用時,常用的策略是透過基因工程技術使目標蛋白質融合到一個"標籤"上,然後在細胞內表達。
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• 從苦蕎中提取的蛋白質用鹼性蛋白酶酶解後,怎麼獲得酶解後的多肽,調ph到等電點、加三氯乙酸沉澱、直接離心哪種方法更好?
評估從苦蕎中獲得酶解多肽的三種常用方法,分別為調整pH至等電點、加三氯乙酸(TCA)沉澱和直接離心。透過對比不同方法的優缺點,探討其適用性和效果,以指導實驗室在蛋白質處理中的選擇。
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• native page跑蛋白,用什麼儀器可以不染色直接看熒光蛋白?native page常用的marker有哪些
介紹了在Native PAGE中如何利用熒光成像系統來直接觀察熒光蛋白,而無需進行染色。同時,介紹了Native PAGE常用的標記物,如牛血清白蛋白、藍色Native標記物、胞色素C、乳酸脫氫酶等,這些標記物用於驗證電泳系統性能、確定電泳條件以及分子量標定。
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• Lc-ms出來的圖譜,資料也會出來嗎,還是說圖要經過軟體,轉化為資料呀?
闡述了液相色譜-質譜聯用(LC-MS)技術中生成的圖譜是原始資料的視覺化表現,包含質荷比(m/z)和訊號強度。然而,要獲得更多資訊,如分子結構、定量分析等,需要藉助專門的數據處理軟體。這些軟體能夠識別峰、解析資料、定量分析,並提供資料視覺化和統計分析。
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介紹了蛋白表徵的概念及其在生物學研究中的重要性。蛋白表徵涵蓋了蛋白質結構分析、功能研究、相互作用分析、動力學研究以及後轉錄修飾分析等多個方面,有助於深入瞭解蛋白質的特性和作用機制。
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• 樣品是混合物,主要成分是澱粉多糖跟混合蛋白質,可以用圓二分析其大分子的二級結構嗎
首先,你提到的圓二色譜(Circular Dichroism, CD)是一種常用於研究蛋白質二級結構的光譜技術。 理論上,圓二色譜可以用於分析混合物中蛋白質的二級結構,但是在實際操作中,如果樣品中含有澱粉、多糖或其他非蛋白質成分,可能會對蛋白質的CD光譜產生干擾,影響解析蛋白質二級結構的準
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