各位大神,質譜什麼情況下測得相對分子量可能較大呢?
質譜測得的相對分子量(或稱為質量/荷比)較大可能是由多種因素造成的。以下列舉了一些可能的情況:
一、非共價修飾和結合
1.磷酸化、糖基化等:
蛋白質或其他生物大分子可能會經歷磷酸化、糖基化或其他種類的修飾,這些都會增加其相對分子量。
2.金屬離子結合:
某些蛋白質可能與金屬離子(如Ca²⁺、Mg²⁺、Zn²⁺等)結合,導致測得的質量增加。
二、聚合和複合物形成
1.同聚體或異聚體:
在質譜分析前,蛋白質可能形成同聚體或異聚體。
2.與其他分子的非共價結合:
例如,蛋白質可能與DNA、RNA、小分子或其他蛋白質形成複合物。
三、實驗條件
1.緩衝液和新增劑:
如果樣品中含有不容易被去除的緩衝液或新增劑,它們可能與目標分子一同進入質譜分析。
2.不完全去除溶劑或新增劑:
質譜分析通常需要將樣品溶於特定的溶劑中。如果這些溶劑或新增劑沒有完全去除,可能會影響質量的測定。
四、分析方法和裝置限制
1.多荷態分佈:
在電離源中,分子可能獲得多個電荷,導致多荷態分佈。在某些情況下,這可能會誤導分析者對高質量物種的解釋。
2.峰值重疊和共混:
特別是在複雜的樣品中,多個物種的峰值可能重疊,導致測得的質量增加。
針對這些問題,通常需要透過多種手段(如使用不同型別的質譜分析、最佳化樣品處理步驟、或者使用其他分析方法等)進行交叉驗證,以確保結果的準確性。
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