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一、MRM是什麼?
MRM(Multiple Reaction Monitoring)是質譜技術中的一種定量分析方法,也稱為多反應監測。它透過選擇特定的前體離子和產物離子對,實現對目標分子的高靈敏度和高選擇性的定量分析。
二、MRM的原理是什麼?
MRM基於質譜儀的三重四極杆(triple quadrupole)結構。在MRM模式下,首先透過Q1(第一四極杆)選擇特定的前體離子,然後透過碰撞誘導解離(CID)使前體離子產生產物離子,最後透過Q3(第三四極杆)選擇特定的產物離子進行檢測。
三、MRM的優勢是什麼?
1.高選擇性:
透過選擇特定的前體離子和產物離子對,可以排除其他干擾物質的影響,提高分析的選擇性。
2.高靈敏度:
由於MRM只監測特定的前體離子和產物離子對,可以減少背景噪聲的干擾,從而提高靈敏度。
3.高定量準確性:
MRM可以透過內標法進行定量,內標物質的加入可以校正樣品中的變異性和分析過程中的誤差,提高定量準確性。
四、MRM在生物藥物領域的應用有哪些?
1.藥物代謝研究:
MRM可以用於藥物代謝物的定量分析,瞭解藥物在體內的代謝過程和代謝產物的生成情況。
2.藥物藥代動力學研究:
MRM可以用於藥物在體內的吸收、分佈、代謝和排洩(ADME)過程的定量分析,評估藥物的藥代動力學特性。
3.蛋白質定量研究:
MRM可以用於蛋白質的定量分析,例如藥物靶標蛋白的定量研究,瞭解藥物與靶標蛋白的相互作用情況。
五、MRM的實驗步驟是什麼?
1.選擇前體離子和產物離子對:
根據目標分子的質荷比和碎裂規律,選擇適當的前體離子和產物離子對。
2.最佳化碰撞能量:
透過調整碰撞能量,使前體離子產生產物離子的丰度最大化。
3.確定定量離子對:
選擇適當的前體離子和產物離子對進行定量分析。
4.建立標準曲線:
透過製備一系列濃度已知的標準品,建立標準曲線,用於定量目標分子。
5.樣品製備和分析:
根據樣品的特性,選擇適當的樣品製備方法,如提取、純化等,然後進行質譜分析。
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