western blot蛋白跑到maker因為什麼?
- 檢查並調整電泳的電壓和時間。
- 最佳化樣品的處理和載入量。
- 確保使用合適濃度和孔隙大小的凝膠。
當進行Western blot實驗時,蛋白質在電泳過程中會被分離並轉移到膜上,然後透過特定的抗體與目標蛋白結合,形成特定的蛋白帶。然而,有時候我們可能會觀察到蛋白質在Western blot過程中跑偏或者出現多個帶的情況。以下是一些可能導致這種情況發生的原因:
1.電泳條件不當:
電泳電壓或電流過高可能會導致蛋白質遷移過快,從而跑到了marker的泳道。
2.凝膠孔隙大小不適:
如果使用的聚丙烯醯胺凝膠孔隙大小不適合目標蛋白的大小,蛋白可能無法被凝膠攔截,從而跑出泳道。
3.樣品載入量過多:
過多的樣品可能會導致蛋白無法在凝膠上分佈均勻,從而跑出樣品的泳道。
4.marker和樣品混合:
在載入樣品時,如果操作不當,marker和樣品可能會發生混合
為解決此問題,可以嘗試以下方法:
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