蛋白分析FAQ彙總
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蛋白質非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳(Native PAGE)是一種在沒有變性條件下分離蛋白質的電泳技術。與SDS-PAGE不同,Native PAGE保留了蛋白質的天然三維結構和生物活性。 一、原理 Native-PAGE 的原理是利用電場使蛋白質在聚丙烯醯胺凝膠中移動。蛋白質的遷移速度取決於
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• 如果一個樣品中有多個未知蛋白,但凝膠電泳中未使用SDS,請你預測可能發生什麼結果,為什麼?
如果一個樣品中有多個未知蛋白,並且在凝膠電泳中未使用SDS,那麼這些蛋白質可能會根據其原有的電荷、形狀和大小在凝膠中分離,而不僅僅是根據其分子量。這可能會使得結果的解析變得更加複雜,因為我們不能簡單地根據蛋白質在凝膠中的位置推斷其分子量。 百泰派克生物科技--生物製品表徵,多組學生物質譜檢
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• 分析為什麼聚丙烯醯胺凝膠凝膠電泳可以分出較多蛋白質區帶?
聚丙烯醯胺凝膠電泳(PAGE)是一種常用的生物化學實驗技術,它能夠根據蛋白質的大小(分子量)或電荷來分離蛋白質。以下是為什麼聚丙烯醯胺凝膠電泳可以分出較多蛋白質區帶的原因: 1. 分子篩選效應: 聚丙烯醯胺凝膠的孔隙大小可以透過改變凝膠濃度來調節。高濃度的聚丙烯醯胺產生小的孔隙,用於分離小
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• SDSPAGE凝膠電泳的maker條帶呈對勾形狀,蛋白條帶無異常,這是怎麼回事?
如果SDS-PAGE電泳Marker(也稱為分子量標準或分子量階梯)在電泳過程中形成了“對勾”形狀,而蛋白質條帶沒有異常,可能是由以下幾個因素引起的: 1. 電泳裝置的問題: 如果電泳裝置的電極接觸不良或者電源供應不穩定,可能會導致電流不均勻,從而影響Marker的執行。這種情況下,你需要
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• 在做蛋白電泳,發現濃縮膠會被壓成一條直線,一進分離膠就會起大的氣泡,條帶就會飛了,大家有什麼建議麼?
一、濃縮膠被壓成一條直線的問題 這個問題可能與濃縮膠的配製或者裝配有關。 建議: 1.檢查濃縮膠的配方: 確保濃縮膠的配方正確,沒有使用錯誤的化學物質或濃度。 2.檢查裝配過程: 確保在裝配過程中濃縮膠與分離膠之間的連線緊密,沒有空隙。 二、分離膠中氣泡的問題 氣泡的產生可能與電泳液
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在電泳過程中,如果發現部分條帶被降解,可能有以下幾種原因: 1. 蛋白質樣品處理不當: 蛋白質樣品在提取、儲存和處理過程中可能會受到降解酶的影響,導致部分蛋白質降解。爲了避免這種情況,需要在提取蛋白質時新增適當的蛋白酶抑制劑,並在低溫條件下進行操作。 2. 電泳條件不適: 電泳條件,包括
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蛋白質電泳使用的支援介質,如聚丙烯醯胺凝膠,在蛋白質電泳中起著至關重要的作用,它不僅可以幫助我們分離和分析蛋白質,還可以保護蛋白質的穩定性,提供視覺化平臺,控制電泳速度,以及保護樣品。在電泳過程中起到的了多方面的作用: 1. 分離蛋白質: 支援介質提供了一個環境,使蛋白質可以根據其大小、形
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SUMO (Small Ubiquitin-like Modifier) 修飾是細胞調控蛋白質功能的一種方式。這種翻譯後修飾透過連線SUMO蛋白到靶蛋白的特定氨基酸殘基上,改變了靶蛋白的穩定性、亞細胞定位、相互作用夥伴或活性。 SUMO修飾不是每個蛋白質都需要的,而是依賴於細胞的特定環境和
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單糖是不能被水解成更小分子的碳水化合物。許多複雜的多糖,如纖維素、澱粉等,在經過酸水解後,可以轉化為單糖。對這些水解後的產物進行分析,可以得知原始多糖中包含的單糖型別及其比例。 換算過程如下: 1.實驗測定結果: 首先確定樣品中所有單糖的總含量。通常,透過分析技術(如HPLC)可以得到各
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在高效液相色譜(HPLC)中,成分的出峰順序並不是直接由分子量決定的。出峰順序主要取決於樣品分子與固定相(色譜柱內的填充物)之間的相互作用。這種相互作用可以包括疏水性相互作用、離子交換、親和作用等等。 1. 疏水性相互作用: 在反相高效液相色譜(RP-HPLC)中,固定相是非極性的,因此更
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