蛋白質非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳？
蛋白質非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳（Native PAGE）是一種在沒有變性條件下分離蛋白質的電泳技術。與SDS-PAGE不同，Native PAGE保留了蛋白質的天然三維結構和生物活性。
一、原理
Native-PAGE 的原理是利用電場使蛋白質在聚丙烯醯胺凝膠中移動。蛋白質的遷移速度取決於其電荷、大小和形狀。在非變性條件下，蛋白質保持其原有的三維結構，因此，不同的蛋白質會因為它們的電荷和形狀的差異而在凝膠中遷移速度不同。
二、步驟
1.樣品準備：
首先，需要準備蛋白質樣品。從細胞或組織中提取蛋白質，並使用適當的緩衝液來保持蛋白質的穩定性和活性。
2.凝膠製備：
製備聚丙烯醯胺凝膠。
3.電泳：
將蛋白質樣品載入到凝膠的樣品孔中，然後在電場的作用下進行電泳。蛋白質會根據其電荷和大小在凝膠中遷移。
4.染色和顯影：
電泳結束後，需要使用特殊的染料對蛋白質進行染色，然後透過顯影步驟來視覺化蛋白質帶。
三、優點
1.保持蛋白質天然狀態：
非變性PAGE允許蛋白質在其原生態形式下被分離，這可能是進行特定生物化學或生物物理研究的重要考慮因素。
2.生物活性保持不變：
因為蛋白質沒有被變性，它們的生物活性得以保持。
3.複雜蛋白質分離：
它可用於分離複雜的蛋白質組合和亞單位。
四、缺點
1.Native-PAGE 的一個主要缺點是它不能直接用於確定蛋白質的分子量，因為蛋白質的遷移速度不僅取決於其大小，還取決於其電荷和形狀。
2.另一個缺點是，由於蛋白質在非變性條件下保持其原有結構，因此，某些蛋白質可能會形成聚合體或複合物，這可能會影響其在凝膠中的遷移。
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