蛋白分析FAQ彙總
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• 流式細胞可以對蛋白絕對定量嗎?我想檢測一種細胞表面兩種膜蛋白的分子數,有什麼好的方法嗎?
流式細胞儀(Flow Cytometry)是一種用於分析和分離細胞的技術。它可以定性地檢測細胞表面或細胞內的標記物,但通常用於相對定量,即比較不同樣品之間蛋白的相對錶達量。爲了實現蛋白的絕對定量,特別是細胞表面的膜蛋白,可以採用以下方法: 1.質譜法: 質譜法可用於絕對蛋白定量,例如多重反
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使用ImageJ進行Western Blot(WB)定量分析的基本步驟如下: 1.匯入影象: 開啟ImageJ程式,選擇‘File’>‘Open’來匯入你的WB影象。 2.調整影象大小和對比度: 爲了得到最佳的分析結果,你可能需要調整影象的亮度和對比度。選擇‘Image’>‘Adjust
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蛋白質、丙氨酸和尿素是生物化學中不同的化合物,它們具有不同的性質和方法來鑑別它們。以下是這三種化合物的簡要鑑別方法: 1.蛋白質: 蛋白質是生物大分子,由氨基酸殘基組成,通常具有複雜的三維結構和多種功能。蛋白質的鑑別方法通常涉及到生化實驗和儀器分析。 一種通用的鑑別方法是使用雙硫鍵還原法(
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紫外吸收法測定蛋白質濃度的基本原理是:蛋白質分子中的芳香氨基酸殘基(主要是色氨酸和酪氨酸)和一些其他的結構元素可以吸收紫外光(特別是在280nm附近的波長)。當紫外光透過含有蛋白質的溶液時,蛋白質分子會吸收部分紫外光。透過測量溶液的吸光度(Absorbance,A),可以評估蛋白質的濃度。根
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可以。紫外分光光度法(UV-Vis分光光度法)是用於定量分析氨基酸和蛋白質的常用技術。 1.氨基酸的定量分析: 某些氨基酸,如色氨酸和酪氨酸,本身可以吸收紫外光,特別是在280nm左右。因此,可以直接使用UV-Vis分光光度法對其進行定量分析。但是,對於那些不吸收紫外光的氨基酸,則需要透過
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• 蛋白質和核酸在紫外吸收的原理是怎樣的?又有什麼差異?帶電機理是怎樣的
一、紫外吸收的原理: 蛋白質和核酸都可以吸收紫外光。這種吸收是由於其分子中某些部分的π電子和非成對的n電子在吸收一定能量的光後躍遷到高能態所引起的。蛋白質中的芳香氨基酸(如酪氨酸、苯丙氨酸和組氨酸)主要負責紫外光吸收。這些氨基酸中的芳香環有π電子,可以在吸收紫外光後躍遷到高能態。核酸的吸收主
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• western blot如何定量測定細胞中某蛋白表達量?
Western blot(蛋白質印跡法)通常用於定性分析蛋白質的存在以及研究它們在不同條件下的表達變化。其大致步驟如下: 1.樣品製備: 使用合適的裂解緩衝液將細胞裂解,並使用蛋白質濃度測定方法(例如BCA或Bradford法)測定蛋白質總濃度。 2.SDS-PAGE: 根據預期的蛋白大
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蛋白質樣品製備是實驗室研究的關鍵步驟,其目的是獲得純淨、功能活躍並適於後續實驗分析的蛋白質。以下是蛋白質樣品製備技術的一些基本原則: 1.樣品處理的一致性: 在整個實驗過程中,應該儘量保持樣品處理的一致性,以避免引入人為誤差。使用相同的方法和條件來處理不同的樣品,包括對照組和實驗組。 2
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• 做組織樣本ELISA時,每個樣品提取的蛋白濃度不同,是否需要進行蛋白定量?BCA或者考馬斯亮藍蛋白定量?
當您進行組織樣本的ELISA實驗時,蛋白濃度的均一性是非常關鍵的,因為蛋白濃度的差異可能導致結果的不一致性。因此,確實需要對每個樣品進行蛋白定量以確保各樣品有相同或已知的蛋白濃度。 有多種蛋白定量方法可供選擇,其中BCA(雙縮氨基酸)和考馬斯亮藍(Coomassie Brilliant B
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火山圖是一種用於顯示統計學顯著性與倍數變化之間關係的圖形。在生物資訊學中,火山圖常用於展示基因或蛋白的表達差異。火山圖的x軸代表對數變化(如對數2倍數變化),y軸代表統計學顯著性的負對數值(如-log10的p值)。 下面是一個使用ggplot2繪製火山圖的基本示例: 在這個示例程式碼中
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