紫外吸收法測定蛋白質濃度的基本原理是什麼?
- 是吸光度。
- 是摩爾吸光係數,表示特定波長下,特定物質每摩爾吸收的光量。
- 是物質的濃度(摩爾/升)。
- 是光透過的樣品的長度(通常是1釐米)。
紫外吸收法測定蛋白質濃度的基本原理是:蛋白質分子中的芳香氨基酸殘基(主要是色氨酸和酪氨酸)和一些其他的結構元素可以吸收紫外光(特別是在280nm附近的波長)。當紫外光透過含有蛋白質的溶液時,蛋白質分子會吸收部分紫外光。透過測量溶液的吸光度(Absorbance,A),可以評估蛋白質的濃度。根據比爾定律(Beer-Lambert定律),吸光度與蛋白質的濃度成正比。
具體來說,比爾定律描述為: 其中:
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