流式細胞可以對蛋白絕對定量嗎?我想檢測一種細胞表面兩種膜蛋白的分子數,有什麼好的方法嗎?
流式細胞儀(Flow Cytometry)是一種用於分析和分離細胞的技術。它可以定性地檢測細胞表面或細胞內的標記物,但通常用於相對定量,即比較不同樣品之間蛋白的相對錶達量。爲了實現蛋白的絕對定量,特別是細胞表面的膜蛋白,可以採用以下方法:
1.質譜法:
質譜法可用於絕對蛋白定量,例如多重反應監測(multiple reaction monitoring, MRM)或平行反應監測(parallel reaction monitoring, PRM)。這些方法結合質譜儀和已知濃度的標準物質,允許您測量蛋白質的絕對分子數。
2.單分子技術:
例如,單分子熒光顯微鏡(single-molecule fluorescence microscopy)或單分子結構照相技術(single-molecule localization microscopy)。這些方法允許您在單個蛋白質水平上觀察和計數細胞表面蛋白。然而,這些技術通常需要高階顯微鏡裝置和高度精確的分析,因此可能需要更多的時間和資源。
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