蛋白分析FAQ彙總

• • 請教您如何做pull down蛋白的質譜分析

  一、蛋白質樣品準備: 1.在pull-down實驗完成後，需要透過多次洗滌步驟清除非特異性結合的蛋白質和其它雜質。 2.使用特定的洗脫緩衝液或直接在SDS-PAGE樣品緩衝液中加熱，以從親和樹脂或珠子中洗脫目標蛋白質。 二、蛋白質分離（可選，取決於樣品的複雜性）: 1.如果樣品中可能

• • 請問有檢測單糖組成，高效液相色譜的操作方法嗎？

  當然，高效液相色譜（HPLC）是一種常用的分析技術，廣泛應用於各種樣品的成分分析，包括對單糖的檢測。以下是一種基本的、用於檢測單糖組成的HPLC操作方法： 1.樣品準備： 根據您的樣品型別（如食品、生物樣品等），採取適當的提取和純化步驟來獲取所需的單糖。通常需要透過水解、離心和/或過濾來準

• • O糖修飾及修飾位點分析有具體的檢測方案嗎

  O-糖修飾（O-Linked Glycosylation）是指糖基透過N-乙醯氨基葡萄糖胺（GlcNAc）、N-乙醯氨基半乳糖（GalNAc）或其他糖類，與蛋白質中的絲氨酸（Ser）或蘇氨酸（Thr）殘基的氧原子形成共價鍵的一種翻譯後修飾方式。這種修飾在細胞間通訊、蛋白質穩定性、免疫識別等過

• • 細胞膜內外兩側結合的蛋白質種類有差異??請解釋。

  細胞膜，作為細胞的外界與內部之間的屏障，是由磷脂雙分子層和嵌入其中的蛋白質組成的。細胞膜上的蛋白質具有多種功能，如通道、受體、酶和結構蛋白。由於細胞需要響應不同的環境和調節多種細胞內過程，所以細胞膜兩側（外部和內部）的蛋白質種類確實存在差異。 1.位置和功能： 細胞膜外側的蛋白質主要參與細

• • 為什麼疏水性差異的兩種蛋白在反相層析和疏水層析上,出峰位置相反呀?

  要理解這個問題，我們要先了解反相層析和疏水層析的基本原理。 一、反相層析 (Reverse Phase Chromatography, RPC) 1.原理： 在反相層析中，固定相（柱填料）是非極性的（如 C18），而移動相（洗脫溶液）是相對極性的，通常基於水/有機溶劑（如乙腈或甲醇）。初

• • 蛋白水平和mRNA水平的差異如何解釋

  蛋白質水平和mRNA水平之間的差異是生物學研究中的一個常見現象，這種差異通常是由於基因表達的多個層面的調控。以下是解釋這種差異的一些關鍵因素： 1.轉錄後調控： mRNA的合成（轉錄）和蛋白質的合成（翻譯）之間存在多種調控機制。mRNA的穩定性、轉運和區域性化都可以影響可用於翻譯成蛋白質的

• • 膜蛋白功能的差異是由什麼造成的?

  膜蛋白功能的差異是由以下因素造成的： 1.氨基酸序列與結構: 膜蛋白的氨基酸序列決定了其三維結構，而這種結構又決定了蛋白質的功能。不同的膜蛋白因其特有的氨基酸序列和結構而具有獨特的功能。 2.脂質雙層中的嵌入方式: 膜蛋白可以跨越細胞膜，部分嵌入，或者與膜脂質或其他膜蛋白相互作用。這些不

• • 蛋白和蛋白質有區別嗎?

  “蛋白”和“蛋白質”這兩個詞經常可以互換使用，都指由氨基酸組成的大分子化合物。它們在細胞中發揮著各種生物學功能，包括催化生物化學反應（酶）、充當訊號分子、參與細胞結構支援、免疫反應等等。 1.蛋白（Protein）： 這個詞通常用於指代特定的、已知的蛋白分子或型別，例如：“血紅蛋白”、“抗

• • 前後兩次純化出蛋白的分子量略有差別是什麼原因

  當在前後兩次純化過程中得到的蛋白分子量出現略有差別時，可能的原因有： 1.蛋白降解： 長時間或不適當的儲存、處理條件可能導致蛋白部分降解，從而導致測得的分子量減小。 2.實驗條件： 輕微的實驗條件變化，例如pH、鹽度、洗脫緩衝液的組成、溫度等，都可能影響蛋白質的結構和隨後的遷移行為，例如

• • 澱粉和糖原的結構差異性與蛋白質結構多樣性的原因相同嗎

  澱粉和糖原的結構差異性與蛋白質結構的多樣性有著根本上的不同，這些差異主要源於它們的生物合成途徑、組成單元和三維結構的形成方式。 一、澱粉和糖原： 1.組成： 澱粉和糖原都是多糖，主要由葡萄糖分子透過糖苷鍵連線而成。它們都作為能量儲存形式存在於生物體中，澱粉主要存在於植物中，而糖原主要存在