HPLC—流動相緩衝液應如何製備？

流動相緩衝液基本上可以透過兩種方式製備：1、在與有機改良劑混合之前調節pH。2、在pH調節之前混合緩衝液和有機改良劑。雖然pH值在水性體系中是一個很好定義的引數，但在部分有機溶劑體系中定義或測量質子濃度並不是那麼簡單。因此建議製備水性緩衝液，調節其pH值，然後與有機改良劑混合。應注意以下幾點：（1）緩衝液在pKA的+/-1 pH單位內有效⇒選擇正確的緩衝系統；（2）如果高濃度緩衝液與有機溶劑混合，考慮沉澱的風險；（3）使用前始終透過0.4 mm過濾器過濾緩衝液；（4）注意純水緩衝液中細菌或真菌生長的風險；（5）pH通常隨著有機改良劑的加入而改變，無機緩衝液（如磷酸鹽）可使pH增加，有機緩衝液（如乙酸酯）可使pH降低。示例：pH7.6的磷酸鹽緩衝液⇒新增40%MeOH⇒pH8.5

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