蛋白分析FAQ彙總
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它是不連續緩衝系統的關鍵。正是甘氨酸的離子狀態真正允許堆疊緩衝液發揮作用。在約為7的中性pH值時,離子同時帶正電荷和負電荷而不帶電(兩性離子)。在較高的pH值下,甘氨酸會更帶負電荷。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離
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主要原因是在蛋白質進入分離凝膠進行分離之前,區分蛋白質在孔中堆疊成條帶時遷移的速率。相應的pH值會影響電泳緩衝液中離子的電荷,從而影響電流開啟時離子的遷移。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離
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SDS-PAGE專門用於視覺化樣品中存在的蛋白質。它是一種可染色所有蛋白質的通用染色劑。DNA和RNA是核酸,不會被染色,因此樣品中的任何核酸汙染在SDS-PAGE凝膠上都不可見。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離
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SDS是最常用的陰離子表面活性劑,具有C12烷基鏈,可穿透油滴,通常以3.3%(w/w)(112mM)的濃度使用。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離
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被SDS溶液汙染,最重要的症狀和嚴重刺激是對眼睛的(灼燒感,發紅和視力受損,包括急性和延遲性視力受損-類似於肥皂在眼睛裏),另外還刺激面板。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離
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有論文指出“蛋白質在pH 8.0下是穩定的”。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離
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蛋白質通常是幾乎中性的分子,也就是說,它們既不具有酸性也不具有鹼性。這意味著天冬氨酸和穀氨酸的酸性羧基(―COO−)基團在數量上與具有鹼性側鏈的氨基酸大致相等。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離
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它是由Laemmli開發的一種電泳系統。該系統主要用作分離蛋白質。在這種電泳系統的幫助下,我們可以分離分子質量為5-250 kDa的蛋白質。該系統還用於分離複雜混合物中的蛋白質。它會影響將要經歷電解過程的蛋白質的分子結構。該電泳系統被用於實現蛋白質的高解析度分離。相關服務:基於SDS-PAG
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該系統包括傳遞電流和使樣品蛋白質透過凝膠向電極移動的方法。這整個過程被稱為SDS-PAGE。它根據質量分離蛋白質。SDS中的離子洗滌劑會變性和附著蛋白質塊,使其均勻地帶負電。 由於蛋白質遷移速率所依賴的因素之間的差異,PAGE和SDS-PAGE之間存在顯著差異。在PAGE中,蛋白質的分離取決
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• 疏水相互作用色譜HIC——如果已經在緩衝液中執行了從高鹽到無鹽的梯度,但仍然有尚未洗脫的蛋白質時該怎麼處理?
當感興趣蛋白在用洗脫緩衝液洗滌後仍然粘附在柱子上時,可以使用低濃度的乙醇甚至乙腈。低濃度尿素或鹽酸胍也可用於使蛋白質變性並使其從色譜柱中洗脫。此外,也可以使用苛性鈉剝離色譜柱以去除不需要的汙染物。疏水性較低的 HIC相則不需要對系統使用後梯度改性劑。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反相色譜
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