蛋白分析FAQ彙總

採用 HIPPR（高蛋白和肽回收）形式使用Pierce Detergent Removal Resin或HiPPR Detergent Removal Spin Columns，可以從肽樣品中去除一些洗滌劑。然而，在蛋白質消化之前，使用丙酮沉澱、透析等方法在蛋白質水平上去除洗滌劑更容易。相關

相對定量是比較不同樣品中分析物的含量。絕對定量是用已知標準在不同濃度下測量樣品中分析物的實際含量。Label-free、SILAC 和 TMT（串聯質量標籤）工作流程被用於蛋白質樣品的相對定量。重（即 AQUA）肽被用作靶蛋白絕對定量的標準。相關服務:組學分析

首先應該檢查的是檢測器燈是否亮著。檢測器和積分器之間的鬆散或斷線也可能是問題的根源。確保泵已開啟或流向色譜柱而不是流向廢液。樣品瓶可能裝有錯誤的樣品或樣品可能已經變質。當樣品溶劑和流動相的組成差異很大或流動相可能比樣品組分對設定的 UV 波長更具吸收性時，就會出現負峰。相關服務:蛋白質純

可變的保留時間通常是由於1.洩漏或流動相組成的變化（流動相的微小變化會導致保留時間的重大變化）引起的。 2.泵頭中滯留的空氣也可以完全隨機的增加或減少保持時間。 3.柱溫波動，特別是在離子交換色譜中，也會導致保留時間的變化。 4.當溶質質量超過色譜柱容量時，保留時間通常會減少，並且隨著體積過

當存在溫度波動（微小的變化可能導致重要的基線漂移）時，通常會出現基線漂移，特別是對於折射率和電導檢測器或高靈敏度的紫外檢測器。流動相混合室工作不正常也會導致流動相不均勻，從而導致基線漂移。檢測器單元中的汙染物或空氣積聚也可能導致基線漂移/噪聲。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）

混合模式色譜是一種分離技術，其至少存在兩種可控的相互作用，以調整化合物的選擇性和保留。混合模式色譜可以將反相或HILIC相互作用與離子交換、離子排斥或 pi-pi 相互作用結合起來。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）

混合模式色譜固定相在表面具有可電離基團，允許使用水相和全有機流動相進行分析。表面上的極性基團可防止反相色譜柱中可能發生的相塌陷。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）

與單模式色譜相比，混合模式色譜可為更廣泛的化合物提供保留和分離。您可以在一次執行中保留和分離中性疏水、疏水可電離、極性、極性可電離化合物以及帶正電和帶負電的無機離子。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）

SDS/MPD系統可用於研究涉及天然蛋白質狀態的過程，有實驗證明了外膜蛋白質PagP在SDS/MPD緩衝液中的可逆熱變性。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離

SDS-PAGE的原理表明，帶電分子被置於電場中時會遷移到與其帶電符號相反的電極上。帶電分子的分離取決於帶電物質的相對遷移率。由於電泳過程中的阻力較小，較小的分子遷移得更快。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離

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