疏水相互作用色譜HIC——如果已經在緩衝液中執行了從高鹽到無鹽的梯度,但仍然有尚未洗脫的蛋白質時該怎麼處理?
當感興趣蛋白在用洗脫緩衝液洗滌後仍然粘附在柱子上時,可以使用低濃度的乙醇甚至乙腈。低濃度尿素或鹽酸胍也可用於使蛋白質變性並使其從色譜柱中洗脫。此外,也可以使用苛性鈉剝離色譜柱以去除不需要的汙染物。疏水性較低的 HIC相則不需要對系統使用後梯度改性劑。
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當感興趣蛋白在用洗脫緩衝液洗滌後仍然粘附在柱子上時,可以使用低濃度的乙醇甚至乙腈。低濃度尿素或鹽酸胍也可用於使蛋白質變性並使其從色譜柱中洗脫。此外,也可以使用苛性鈉剝離色譜柱以去除不需要的汙染物。疏水性較低的 HIC相則不需要對系統使用後梯度改性劑。
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