前後兩次純化出蛋白的分子量略有差別是什麼原因
當在前後兩次純化過程中得到的蛋白分子量出現略有差別時,可能的原因有:
1.蛋白降解:
長時間或不適當的儲存、處理條件可能導致蛋白部分降解,從而導致測得的分子量減小。
2.實驗條件:
輕微的實驗條件變化,例如pH、鹽度、洗脫緩衝液的組成、溫度等,都可能影響蛋白質的結構和隨後的遷移行為,例如電泳緩衝液的製備、樣品的處理、凝膠的選擇等,可能導致蛋白在電泳時的遷移性發生變化。
如果你是透過SDS-PAGE來確定蛋白質的分子量,需要注意的是凝膠的濃度、孔隙大小、SDS的濃度、甚至電流的強度和電泳時間都可能影響蛋白質的遷移率。
3.樣本載入量和純度:
不同的樣本純度和濃度可能會影響SDS-PAGE結果,因為過度載入的蛋白質可能會導致遷移異常。
5.裝置誤差:
使用的儀器可能存在校準不準確或其他誤差,從而導致測定結果出現偏差。
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