蛋白分析FAQ彙總
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如果凝膠要儲存超過一個月,應該用保鮮膜包裹並儲存在冰箱中。如果小於1個月,可以在室溫下儲存,不會影響質譜分析。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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取凝膠蛋白點時,將0.2ml槍頭的尖端剪斷,用其取出凝膠並轉移到0.5ml離心管中。用水沖洗珠子兩到三次,然後吸乾管子。保持所有防潮密封件就位並做好標記。離心管最好選用進口離心管,避免塑膠汙染。最好使用去離子水或雙蒸水。帶上口罩和手套以防止角蛋白汙染。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質
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蛋白凝膠可以長期儲存,不影響質譜鑑定。一般來說,如果是一兩週內,最好用保鮮膜包好並存放在4度冰箱。若儲存時間超過1個月,可將蛋白點取出置於-20℃或-80℃冰箱中,不影響後續質譜鑑定。在運輸蛋白凝膠點時,可以常溫運輸,三到五天不會有太大影響。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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一級質譜鑑定方法通常稱為肽質量指紋 (peptide mass fingerprinting,PMF)。二級質譜鑑定方法通常稱為串聯質譜。早期的蛋白質鑑定,考慮到成本,已測序生物的蛋白質鑑定一般可以用一級質譜儀完成,而未測序生物往往選擇二級質譜。但現在,二級質譜儀的價格也大大降低,與一級質譜
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質譜鑑定主要包括三個步驟:蛋白質水解、質譜資料採集、庫檢索。每個蛋白點的鑑定,一般提供三類資料,包括:質譜圖(PDF格式,包括1張一級質譜和5-10張二級質譜)、質譜峰列表(文字格式,主要是部分MS碎片資訊)和檢索結果(自建庫本地化搜尋一般為PDF格式或excel格式;Mascot線上搜尋一
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用於蛋白質測序的SequiBlot PVDF膜(0.2μm)。相關服務:基於Edman降解的蛋白N端序列分析
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不可以,必須轉移到序列級PVDF膜上。相關服務:基於Edman降解的蛋白N端序列分析
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可以,前提是樣品是純的並且在低鹽緩衝液中,例如50毫米碳酸氫銨;對於TRIS或磷酸鹽緩衝液,最大鹽強度為20mM。NaCl、表面活性劑(如SDS)和甘氨酸不能存在。裝運前,樣品必須在微型離心管中冷凍乾燥或凍幹。相關服務:基於Edman降解的蛋白N端序列分析
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對於純蛋白,靈敏度限約為1pmol,但建議提供10pmol以確保滿意的結果。若為考馬斯染色的目標帶必須肉眼可見。相關服務:基於Edman降解的蛋白N端序列分析
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在生理狀態下蛋白質的N末端殘基發生翻譯後修飾的現象。這是一個發生在細胞中的生物過程,通常不是樣品製備過程。常見的N-末端封閉基團包括焦穀氨酸、N-乙醯基如乙醯絲氨酸或乙醯蘇氨酸和N-甲醯化氨基酸。相關服務:基於Edman降解的蛋白N端序列分析
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