蛋白分析FAQ彙總
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可以,蛋白酶抑制劑將減少蛋白質降解。相關服務:蛋白分析
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是的,因為蛋白質組分析不適用於未知基因組的樣本。相關服務:組學分析
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這取決於載入在凝膠上的樣品的複雜性。根據我們的經驗,我們已經從複雜的細胞裂解物在 12%T minigel 上執行後的一條凝膠條帶中鑑定出多達 70 種蛋白質。我們強烈建議不要使凝膠過載,因為它會影響蛋白質的解析度和分離。此外,它可能導致 LC 中大量肽的“攜帶”,從而導致在不同樣品中重複鑑
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可以,如果它是透過質譜相容的銀染流程染色的。許多商業供應商出售此類試劑盒。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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• 是僅使用胰蛋白酶消化蛋白質還是可以使用其他蛋白質水解酶?
如果要對樣品進行“溶液內消化”,可以使用市售的測序級蛋白水解酶中的任何一種或組合。對於“凝膠內消化”,可用蛋白水解酶變得更加有限。請注意,許多高分子量酶在凝膠內消化方面的效率不如胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。相關服務:蛋白分析
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是的。最簡單和最便宜的方法是使用 TCA 和丙酮沉澱等沉澱技術。這些方法的缺點是一旦沉澱,一些蛋白質很難再懸浮在目標緩衝液中。我們提供使用 Pierce 洗滌劑去除試劑盒來去除洗滌劑的服務。我們已成功使用該試劑盒從樣品中去除辛基麥芽糖苷和 SDS。應該注意的是,所有技術的成功都取決於洗滌劑的
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• 我的蛋白質複合物在鹽濃度非常高的緩衝液加 5% 甘油中。這種緩衝液與質譜相容嗎?
不相容。鹽和甘油與質譜不相容。如果樣品含有鹽或甘油,我們將使用 zip 吸頭或 C18 離心柱對樣品進行脫鹽。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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質譜鑑定不成功主要分為兩類。一個原因是質譜無效,另一個原因是蛋白質資料庫沒有參考資料。導致質譜結果不成功的原因可細分為:(1)蛋白點過淺,蛋白含量過低;(2)蛋白點太小,不利於操作;(3)雖然用二維電泳分離,但蛋白點仍是幾種蛋白質的混合物;(4)蛋白質水解和質譜誤差。 爲了避免這些因素,需
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質譜鑑定通常使用軟體自動匹配現有資料庫以獲得結果。而質譜測序需要根據質譜圖中相鄰或相似峰的分子量差異直接計算肽段序列。相關服務:蛋白性質分析
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更簡單的方法是質譜,且成本也不貴。如果質譜不能確定,也可以結合N端測序。這兩個資料組合分析基本可以確定目標蛋白。相關服務:序列分析
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