蛋白分析FAQ彙總

• • 你們的蛋白質消化方案是什麼？

  如果可能，我們使用SP3 協議或PreOmics iST 試劑盒進行蛋白質消化。在某些情況下，我們使用 FASP、TCA 或 PCT 消化方案。相關服務:定量蛋白組分析

• • 你們提供單細胞蛋白質組學嗎？

  我們不支援單細胞蛋白質組學，但我們已經為“低投入”蛋白質組學建立了自動化工作流程。我們可以從大約 2000 個分選的細胞樣本中可靠地量化數千種蛋白質，但我們也可以分析只有 500 個或更少細胞的樣本。相關服務:組學分析

• • 翻譯後修飾分析需要多少蛋白質？

  我們建議蛋白質條帶或斑點的濃度足以透過考馬斯 G250 染色檢測。初始蛋白質鑑定需要兩個條帶才能進行，儘管該過程可以使用較少的材料。更多的材料會增加獲得成功結果的可能性。相關服務:翻譯後修飾蛋白組分析

• • MRM（Multiple reaction monitoring）可以分析什麼型別的樣品？

  基本上任何可以被電離然後碎裂的化合物都可以用於 MRM 分析。最典型的例子是測量複雜混合物（如血漿和血清）中的蛋白質和肽、代謝物或藥物。蛋白質定量是可能的，透過對與目標蛋白質相對應的消化肽進行 MRM 實驗。這使得 MRM 分析成為生物標誌物分析中檢測和定量的常見選擇。顧名思義，每次分析可以

• • MRM 有多靈敏？

  這是一種高靈敏的技術。可以檢測典型質譜方法通常看不到的肽化合物。例如，可以在飛摩爾濃度下準確定量肽。在血漿等複雜樣品中，可以在 μg/ml 濃度下對肽進行定量。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析

• • MRM 與絕對或相對定量相容嗎？

  該技術可以為任一型別的定量提供結果。相對定量通常很簡單，但對於絕對定量，需要適當的標準。對於絕對定量，針對加標的內標（例如合成的穩定同位素標記的肽內標）對特定肽進行定量，以測量蛋白質濃度。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析

• • 是否需要方法開發？

  是的。每個專案都是特定的，需要大量的操作時間來開發和執行 MRM 分析。對於複雜的混合物，一些樣品可能需要用色譜分離進行淨化。對於血漿和血清，需要進行額外的準備工作，並將收取額外費用。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析

• • 蛋白質組定量分析需要多少蛋白質？

  iTRAQ 實驗的最佳用量是 50 µg 標記蛋白。樣品淨化過程中的損失可能相當大，並且這是特定於樣品的。因此，我們建議提供 200-500µg 的樣品，更多的量將提高對低丰度蛋白質的敏感性。相關服務:定量蛋白組分析

• • 什麼型別的樣品可以進行蛋白質組定量分析？

  細胞裂解物，分泌的蛋白質樣品，但不能是放射性樣品。注意：分泌的樣本必須在無血清/無血漿的培養基中。相關服務:定量蛋白組分析

• • 蛋白質組定量分析樣品的最大體積是多少？

  樣品體積必須小於 250 µL。相關服務:定量蛋白組分析