蛋白分析FAQ彙總

• • 如何從凝膠上切割蛋白質條帶/斑點？

  使用一個新的乾淨的刀片切出所需的蛋白質帶/點。始終戴著手套在乾淨的玻璃板上切割凝膠。將凝膠片放入新 Eppendorf 管中。即可用於蛋白質鑑定分析。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定

• • 什麼是角蛋白，如何避免樣品被角蛋白汙染？

  角蛋白是一種天然存在的蛋白質，存在於例如頭髮、死皮、乳膠手套、DTT、緩衝液和羊毛衣物中。透過穿著實驗室服和非乳膠手套最大限度地減少角蛋白汙染是必不可少的。此外，所有與凝膠接觸的東西都應該沒有灰塵，例如，用 70% 乙醇清洗。在乾淨的工作區域（如層流罩）進行凝膠內消化。相關服務:蛋白膠點、膠

• • 蛋白質鑑定的原理是什麼？

  蛋白水解消化產生肽。如果在凝膠內消化，則從凝膠塊中提取肽。在小規模 HPLC 材料上進行肽淨化和濃縮。透過 MALDI 質譜或 ESI-LC 質譜進行 MS 和 MS/MS 分析。透過 Mascot (MatrixScience) 等軟體搜尋蛋白質氨基酸序列資料庫。相關服務:蛋白鑑定

• • 什麼是序列覆蓋？

  序列覆蓋表示透過質譜觀察到的肽段中發現的蛋白質序列中氨基酸的數量。相關服務:蛋白質質譜鑑定

• • 你們能鑑定蛋白質修飾並進行更詳細的蛋白質表徵嗎？

  我們提供多種翻譯後修飾服務，包括二硫鍵分析和糖基化分析。除此之外，我們還提供物理化學和結構特性的測定。相關服務:翻譯後修飾蛋白組分析

• • 你們能從蛋白質印跡中鑑定蛋白質嗎？

  我們可以透過胰蛋白酶消化，然後進行 nanoLC-MS/MS 肽分析和資料庫搜尋，在從 1D SDS PAGE 中切除的凝膠帶中鑑定出幾種蛋白質。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定

• • 你們能鑑定一個凝膠條帶中的多種蛋白質嗎？

  我們可以透過胰蛋白酶消化和隨後的nano LC-MS/MS 肽分析鑑定凝膠條帶中的多種蛋白質。我們在UniProt資料庫中搜索所有已知的蛋白質。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定

• • 我沒有得到陽性蛋白質鑑定。什麼地方出了錯？

  這個問題可能是由幾個問題引起的。也許您樣品中的蛋白質不存在於 UniProt 資料庫中，例如，如果蛋白質是全新的並且生物體基因組未測序。相關服務:蛋白鑑定

• • 什麼是分子量測定？

  分子量或分子質量是一個分子基於其各個原子的原子質量的總質量。透過提供具有低測量誤差（百萬分之幾，ppm）的質量測定，質譜可以精確測定分子組成。相關服務:分子量測定

• • 如何使用質譜服務進行肽圖譜分析？

  肽圖譜透過確定蛋白質氨基酸序列，利用內切蛋白酶（酶）產生肽，然後透過 HPLC 與質譜聯用進行分析，被用於確認蛋白質一級結構。重要的是，肽圖譜還可以定位翻譯後修飾 (PTMs) ，包括： N-和O-糖基化 ；N端焦穀氨酸 ；乙醯化/甲醯化；C端賴氨酸剪裁；蛋白質穩定性指示修飾，包括脫醯胺和氧