蛋白分析FAQ彙總
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多組學分析可廣泛應用於各個研究領域。在醫學上,用於研究生物標誌物、發病機制、疾病亞型、傳染病的診斷和治療等。在植物生理病理學研究中,對生長髮育、脅迫與非脅迫反應機制、作物育種等研究具有重要幫助。它也可以應用於微生物,畜牧和環境科學等的研究。相關服務:多組學整合分析
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SDS-PAGE可以根據電荷的差異和由於不同分子大小導致的不同遷移率來分離蛋白質。如果蛋白質樣品已高度純化且僅含有一種蛋白質,則SDS-PAGE分離後的結果將顯示單個蛋白質條帶。相關服務:SDS-PAGE蛋白質純度分析
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因為無論蛋白質是不純的還是質量差的,壞的樣品都會導致大量的問題,導致實驗的不準確和低精度,有時會導致實驗完全失敗!相關服務:蛋白質純度和均一性表徵
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十二烷基硫酸鈉的含量不超過0.1%。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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對於只含單一蛋白質的溶液來說,蛋白含量至少保證15μg;而對於混合蛋白溶液來說,蛋白總量不少於50μg。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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如果是檢測單一的或某幾個條帶,需要進行染色,可以採用考染或者與質譜相容的試劑進行銀染,染色不必過深;全部整個泳道蛋白的,可直接固定無需染色。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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單一蛋白條帶的蛋白量至少在20μg以上;若為整個泳道蛋白,蛋白總量要求不少於 50μg。需要注意的是膠條蛋白量不能依靠膠條染色的顏色深淺來判斷,因為顯色時間越長,顏色會越深。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
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對於懸浮的細胞溶液:首先1000g,4℃離心5min,棄上清;再加入4℃預冷的PBS輕輕吹打洗滌沉澱後,1000g,4℃離心5min,重複三次,最後將細胞沉澱用液氮速凍,並於-80℃儲存。如果是貼壁細胞:先棄掉培養基,再加入4℃預冷的PBS洗滌細胞,重複三次,最後一次用預冷的細胞刮棒輕輕的將
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• CO-IP拉下來的蛋白質譜沒有檢測到,是不是說明CO-IP實驗失敗了?
不一定,因為質譜沒有檢測到目的蛋白可能是由於目的蛋白的丰度太低,質譜只能證明蛋白存在,不能證明不存在。相關服務:CO-IP免疫共沉澱法蛋白互作分析
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SDS-PAGE(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳是Ulrich K. Laemmli開發的一種不連續電泳系統,常用於分離和鑑定分子量在250 kDa之內的蛋白質混合物。十
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