蛋白分析FAQ彙總

• • 蛋白質組學分析（色譜質譜方向）前景怎麼樣呢？

  蛋白質組學分析（尤其是液相色譜-質譜技術）在近年來已經取得了顯著的進展，成為生物醫學領域重要的研究手段。隨著科學技術的不斷髮展，蛋白質組學分析的前景非常廣闊： 一、技術層面： 隨著質譜技術的不斷髮展和創新，如更高的解析度、更高的質量準確度和更高的靈敏度，使得蛋白質

• • 兩臺液質，在一臺進完樣後拿去另外一臺進樣，結果不一樣，這兩臺平常做低濃度不會有這種情況，謝謝各位指導？

  當兩臺液相質譜儀（LC-MS）在分析同一樣品時，如果出現結果不一致的情況，可能有以下原因： 1.儀器校準和效能差異：兩臺儀器可能存在校準和效能差異，如離子化效率、檢測器響應、質量解析度等。建議定期對兩臺儀器進行校準和維護，以確保儀器效能穩定。 2.操作差異：操作人

• • 為什麼有的離子源可以用於質譜成像，有的不行？

  質譜成像（Mass Spectrometry Imaging, MSI）是一種將質譜技術應用於樣品表面成像的方法。它可以直觀地顯示樣品表面分佈的化學成分和相對丰度。在質譜成像過程中，離子源的選擇至關重要。有些離子源適用於質譜成像，而有些則不適用，這主要取決於以下幾個因素：

• • 【Western Bloting實驗】轉膜不充分是什麼原因？

  Western blotting實驗中，轉膜（transfer）是將蛋白質從聚丙烯醯胺凝膠（SDS-PAGE）轉移到膜（如聚偏氟乙烯膜（PVDF）或硝酸纖維素膜（NC））的過程。轉膜不充分可能導致蛋白質訊號弱或檢測不到。以下是一些可能導致轉膜不充分的原因： 1.轉膜時間

• • 高效液相色譜儀怎麼對峰面積進行手動積分？

  高效液相色譜儀（HPLC）通常配備了數據處理軟體，用於實時或離線處理色譜資料。在數據處理軟體中，可以對峰面積進行自動或手動積分。以下是一般步驟，用於在HPLC數據處理軟體中進行手動積分： 1.開啟色譜資料：在數據處理軟體中，找到並開啟需要進行手動積分的色譜資料檔案。

• • 蛋白質質譜，OE/SI是什麼意思?

  OE/SI是蛋白質質譜資料中的兩個指標，用於表示質譜譜峰的訊號強度和峰形對稱程度。 OE（Observed-to-Expected ratio）指的是質譜譜峰的訊號強度與預期訊號強度之比，通常用於評估質譜峰的可靠性和鑑定結果的準確性。預期訊號強度是根據蛋白質序列中的氨基

• • 蛋白純化標籤該怎樣選擇呢？

  蛋白純化標籤（protein purification tags）通常用於幫助研究人員純化和檢測目標蛋白。在選擇合適的蛋白純化標籤時，需要考慮多種因素，以下是一些建議： 1.純化效率：不同的標籤系統在純化效率上可能有所不同。考慮使用那些在實踐中被證明具有高純化效率的標籤

• • PRM技術有哪些常見問題？

  平行反應監測（Parallel Reaction Monitoring， PRM）是一種靶向質譜定量技術，透過對特定蛋白質的肽段進行高分辨、高精度的選定反應監測（SRM），實現蛋白質的高靈敏度準確度和高定量。儘管PRM技術在許多方面具有優勢，但在實際操作中仍可能面臨一些問題，

• • 高效液相色譜串聯質譜可以定量嗎？

  當然可以！高效液相色譜串聯質譜（HPLC-MS/MS）是一種廣泛應用於生物分析領域的技術，在HPLC-MS/MS方法中，高效液相色譜（HPLC）用於將複雜的樣品中的組分分離，而質譜儀（MS/MS）用於對分離後的組分進行準確的檢測和定量，透過結合HPLC的分離能力和質譜的靈敏度

• • 如何測定蛋白質的一級序列 具體步驟以及每一步的原因？

  測定蛋白質的一級序列通常使用蛋白質質譜分析方法，如液相色譜串聯質譜（LC-MS/MS）。以下是具體的步驟以及每一步的原因： 1.蛋白質純化：首先需要純化目標蛋白質。純化的目的是爲了消除雜質蛋白對質譜分析的干擾。純化方法包括離子交換層析、親和層析、凝膠過濾層析等。