什麼是 SDS-PAGE 凝膠?什麼是還原條件與非還原條件?
SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate – polyacrylamide gel electrophoresis)是一種按質量分離蛋白質的方法。SDS 是一種離子型去汙劑,可以變性並結合蛋白質,使蛋白質帶上均勻的負電荷。這意味著當向聚丙烯醯胺凝膠施加電流時,與 SDS 結合的蛋白質將沿凝膠向下遷移到帶正電的電極,蛋白質僅按大小分離。 在 SDS-PAGE 凝膠上執行之前,可以還原蛋白質。在還原條件下,加入 β-巰基乙醇(β-ME 或 2-ME)或二硫蘇糖醇(DTT),這減少了蛋白質中的二硫鍵,因此當它們在凝膠上執行時,可以更好地按大小分開。許多生長因子是二硫鍵連線的二聚體,在與還原蛋白相同的凝膠上執行非還原蛋白可以確認正確的二聚體狀態。
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