蛋白分析FAQ彙總

• • SDS-PAGE有哪些應用？

  SDS-PAGE的應用如下： 用於測量分子的分子量。 用於測量蛋白質的大小。 用於肽圖分析。 用於比較不同結構的多肽組成。 用於清楚蛋白質的雜質。 用於分析多肽亞基的大小和數量。 用於分析翻譯後修飾。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離

• • SDS在SDS-PAGE中有什麼作用？

  SDS 可以定義為存在於SDS-PAGE樣品緩衝液中的洗滌劑。SDS的功能是破壞蛋白質的二硫鍵，與一些還原劑一起破壞蛋白質的三級結構。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離

• • SDS在SDS-PAGE中的功能是什麼？

  SDS（十二烷基硫酸鈉）是一種陰離子洗滌劑，可使蛋白質展開和變性，並以負電荷包裹蛋白質。SDS被過量地新增到蛋白質中，以便覆蓋蛋白質的內在電荷，並且所有蛋白質獲得相似的荷質比。透過這種方式，蛋白質的遷移速率將取決於它們的大小，而不是它們的內在電荷。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離

• • 如何透過SDS-PAGE確定蛋白質的分子量？

  SDS-PAGE是確定未知蛋白質分子量的主要方法。具有已知分子量的蛋白質和未知樣品同時進行電泳。染色後，根據標準蛋白的相對遷移率和分子量的對數，可以得到一條線，並利用未知樣品的相對遷移率確定其分子量。在實驗室中，一種與染料共價偶聯的標準分子量蛋白質被用作參考，以大致指示未知蛋白質的大小。這種

• • 如何知道蛋白質 N-/O-糖基化了嗎？

  雖然大多數 N- 和 O- 糖肽都可以透過肽圖譜檢測到，但檢測N-糖基化最靈敏和最可靠的方法是用 N-糖苷酶酶解和熒游標記。RapiFluor 是一種在熒光和 MS 訊號強度方面均可靠且靈敏的標記試劑。使用 2AB 或普魯卡因胺進行熒游標記可用於分析蛋白質的 O-糖基化譜。相關服務:糖基化定

• • 如何分析蛋白質的 N-糖基化？

  當然有各種方法，但我們認為最合適的技術是酶促釋放 N-糖和熒游標記。透過 HILIC 色譜分離和定量，MS/MS 鑑定。在重疊峰的情況下，峰面積與 MS 訊號強度混合，為您提供每個糖結構的最準確的相對定量。相關服務:N-糖分析服務

• • 糖基化位置在哪？

  如果氨基酸序列包含共有序列 NXS/T（其中 X 是除 P 之外的任何氨基酸），則可能發生 N-糖基化。O-聚糖最容易在絲氨酸或蘇氨酸殘基上檢測到，但它也可以連線於羥賴氨酸或羥脯氨酸。相關服務:糖基化位點分析

• • 蛋白質上有多少個糖基化位點？

  使用蛋白水解酶解物透過 LC-MS/MS 肽圖譜分析最容易確定不同糖基化位點的數量。糖基化肽從序列資訊和與糖結構的特徵質譜片段（氧鎓離子）的相關性中被鑑定。相關服務:糖基化位點分析

• • 如何確定唾液酸苷化程度？

  N-糖唾液酸苷化程度的計算被整合在 GlycoFiler 工作流程對糖鏈引數的自動評估中。或者，唾液酸的量和型別可以透過外切糖苷酶消化來確定。相關服務:N-糖分析服務

• • N-糖分析需要多少蛋白質？

  對於 N-糖分析，至少需要 15 µg 蛋白質。相關服務:N-糖分析服務