蛋白分析FAQ彙總

• • 樣品的純度或清潔度是否會影響資料的輸出？

  像大多數科學實驗一樣，更高質量的樣品會產生同樣更高質量的結果。嚴格的提取技術，去除鹽，洗滌劑，聚合物和其他對質譜儀有害的化合物，將產生更好的結果。更清潔的樣品還可以延長色譜柱的使用壽命。洗滌劑和鹽是質譜檢測的障礙。相關服務:蛋白分析

• • 你們能檢測出蛋白質上所有可能的翻譯後修飾嗎？透過質譜法，你們可以看到蛋白質上哪些型別的修飾？

  氨基酸殘基上可能有許多不同的修飾。許多可以透過我們的質譜法檢測，如磷酸化，甲基化，乙醯化，氧化等。然而，有些修飾根據新增物的大小、電離和穩定性方面不可能檢測到。額外的處理步驟和/或特定的定製質譜儀被用於不同型別的修飾。相關服務:翻譯後修飾蛋白組分析

• • 如何處理需要特殊儲存或處理的樣品？

  光敏 對光敏感的樣品可以放在覆蓋有鋁箔的小瓶中。 低溫儲存 如果樣品需要儲存在低溫（冷藏或冷凍）下，請聯絡我們。 空氣敏感 對空氣敏感或不穩定的樣品需要特別注意。請在提交樣品前提前與我們聯絡以進行安排。 酸/鹼敏感 如果向樣品中加入酸或鹼，某些樣品會降解。如果您提交的樣品對酸或鹼敏感，請註明

• • 什麼是單位質量或精確質量？我應該要求哪一個？

  單位質量 在單位質量或標稱質量中，質量通常精確到十分之幾Da。標記為低解析度的質譜儀通常提供單位質量。 精確質量 在精確質量測量中，使用高解析度質譜儀將質量精確地確定到小數點後四位。通常，質量精度低於5 ppm。僅針對提交給ESI和APCI的樣品提供精確質量。相關服務:精確質量測定

• • 色譜柱的背壓異常高該怎麼辦？

  假如裝置沒有問題，我們建議您更換色譜柱，並以相反方向清洗色譜柱，以確保色譜柱頂部沒有堆積物。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）

• • 如何清洗受汙染的色譜柱？

  使用具有更多離子的更強流動相以相反的方向清洗色譜柱。對於反相混合模式色譜柱，使用 60-70% 的乙腈和 0.3% 的硫酸或磷酸。或者使用50-100mM甲酸銨緩衝液（pH3）和60-70%的ACN。對於 HILIC 混合模式色譜柱，使用較少的乙腈 (20-30%)清洗 ，但新增劑的用量與R

• • 如何製備和調整流動相的pH值？

  建議製備緩衝液的水溶液，然後使用與緩衝液相同的酸來調節pH值——甲酸用於甲酸銨，乙酸用於乙酸銨。對於更穩健的方法，請將pH值保持在所需pH值的0.05單位內。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）

• • 如果待分析化合物在甲酸或乙酸流動相中沒有洗脫該怎麼辦？

  可以換用相對應的緩衝液。鹽會產生更多離子，可用於增加流動相的強度。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）

• • LC色譜柱上可以注入多少樣品而仍能避免譜帶展寬？

  進樣量以及最佳流速受到色譜柱尺寸的限制。理想情況下，如果樣品與流動相使用相同的溶劑，則大致體積應為：30-100mm色譜柱的樣品體積1-3ul；50-150mm色譜柱的樣品體積2-12ul；50-250mm色譜柱的樣品體積8-40ul。相關服務:蛋白質純度分析（分子篩/反相色譜）

• • 蛋白純化——分析色譜和製備色譜的區別是什麼？

  分析色譜法用於確定樣品中分析物的存在以及可能的濃度。 例如透過尺寸排阻色譜法估計抗體樣品中的聚集體/二聚體含量。製備色譜用於純化足夠量的物質以供進一步使用，例如用於功能或結構研究。相關服務:蛋白質純度和均一性表徵