蛋白分析FAQ彙總

  • • 若化合物呈現共洗脫該如何調整分離的選擇性?

    同一色譜柱中可以使用四個引數來調整選擇性:有機物量、緩衝液pH值、緩衝液濃度和緩衝液性質。所有這些引數都有助於達到所需的解析度和保留時間。通常可以選擇改變緩衝液pH值和緩衝液濃度來改變化合物的洗脫順序。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反相色譜)

  • • 為什麼化合物注入混合色譜柱進行分析時沒有看到任何峰值?

    確保沒有峰值不是由於裝置故障造成的,並且使用的特定檢測技術可以看到所分析的化合物。一旦消除了裝置的潛在問題,就可以考慮修改流動相組成。在大多數情況下,可以增加(或減少)流動相有機成分的數量(在HILIC和RP模式下)以及增加流動相中離子的數量來增加流動相的強度。您還可以調整pH值,以減少帶電

  • • 如何在反相混合模式色譜中增加/減少流動相的強度?

    對於透過反相機制保留的化合物,增加或減少流動相強度的方法與單模式反相色譜法相同。流動相中更多的有機成分將有助於洗脫,而更少的有機成分可使化合物在色譜柱中停留的時間更長。對於可電離的化合物,則需要考慮以何種模式操作-離子交換還是離子排斥。在離子交換模式下,可以透過增加緩衝液濃度來增加流動相的強

  • • 如何改善分析物的峰形?

    混合模式色譜可提供比單模式色譜更好的峰形。如果進行色譜分析時化合物出現變形或峰形不佳,很可能是使用的色譜柱或pH值不當。另一個原因可能是色譜柱過載,這可以透過使用更強的混合模式色譜柱、更弱的流動相或更少進樣來改善。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反相色譜)

  • • 調整流動相的pH值需要多準確?

    建議將pH值保持在0.05 單位內,以確保方法的穩定性和分離的重現性。相關服務:蛋白質純度分析(分子篩/反相色譜)

  • • 你們是否提供天然或重組蛋白或大於3kDa的大肽的分析?

    是的,我們提供多種分析選項,用於分析和表徵天然或重組來源的蛋白質,或更大的肽 (>3kDa)。 提供的方法示例如下: 高解析度SDS-PAGE:測試將顯示樣品中是否存在天然蛋白質或重組蛋白質或多肽,是否也存在目標質量,以及它是否是單一的純蛋白質。建議將此測試作為大多數分析方案的起始測

  • • LC-MS與LC-MS/MS的區別是什麼?

    LC-MS儀器基本上是帶有一個質譜檢測器的HPLC裝置,而LC-MS/MS是帶有兩個質譜檢測器的高效液相色譜裝置。相關服務:蛋白質質譜鑑定

  • • 變性後的蛋白應怎樣儲存?可以儲存多久?

    在-80℃的條件下儲存1-2年沒有問題。相關服務:樣品製備

  • • 同一種抗體可以既用於WB又用於免疫組化嗎?

    這要看抗體識別的是那種抗原決定簇(表位),如果該抗體識別的是抗原的線性表位(連續的幾個氨基酸),那它可以同時用於兩種分析;如果該抗體識別的是構象性表位,則只能用於免疫組化分析。相關服務:蛋白質免疫印跡和電轉移服務

  • • 做WB時,為什麼要用甲醇浸泡PVDF膜?

    甲醇可以活化PVDF膜上面的正電基團,甲醇浸泡後的PVDF膜可以容易跟帶負電的蛋白質結合。相關服務:蛋白質免疫印跡和電轉移服務

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