蛋白分析FAQ彙總

• • 如何儲存SDS-PAGE凝膠？

  通常在每次實驗前製備新鮮的SDS-PAGE凝膠。然而，凝膠也可以在4°C的清水中儲存約一週。如果凝膠在染色後不能及時拍照，則需要將其置於水中，以防止凝膠乾燥和收縮。建議儘快拍攝染色結果。如果凝膠長時間浸泡在水中，條帶會分散。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離

• • 凝膠是由什麼組成的？

  PAGE是丙烯醯胺的聚合物。 雙丙烯醯胺作為交聯劑，將聚丙烯醯胺鏈連線起來，這最終形成作為分子網的聚丙烯醯胺鏈的三維網路。 由於雙丙烯醯胺只是連線丙烯醯胺聚合物鏈的交聯劑，因此雙丙烯醯胺：丙烯醯胺在凝膠中的比例約為1∶35。相關服務:基於SDS-PAGE的蛋白分離

• • 為什麼在凝膠中將蛋白質分子量參照物與蛋白質樣品一起執行是有用的？

  用於估計實驗樣品中多肽的大小。 蛋白質分子量參照物的每個條帶對應於單個分子量。透過目視觀察實驗樣品中的多肽與分子量參照物條帶相比遷移了多遠，可以估計其分子量。 蛋白質分子量參照物的其他次要用途包括：在凝膠電泳期間，視覺確認特定大小的多肽在電泳過程中可能遷移了多遠；確認蛋白質在隨後的操作（如蛋

• • 電泳後蛋白質凝膠在什麼時候不染色？

  雖然有些凝膠在SDS-PAGE之後染色，但有些沒有。未染色的凝膠會用於下游分析程式。在這種情況下，可以避免染色凝膠，因為它可能會阻礙後續實驗步驟。 一種非常常見的蛋白質分析技術，其中進行了SDS-PAGE但凝膠未染色，而用於其他下游步驟是蛋白質印跡（Western blot）。相關服務:基於

• • 樣品可以以凝膠或液體形式提交嗎？

  除完整蛋白質分子量測定以外的所有服務，樣品可以以凝膠或液體形式提交。 a.用於完整蛋白質分子量分析的樣品應為液體形式（即在緩衝液中）。緩衝液不應含有任何洗滌劑。凝膠樣品不適合，因為無法有效地從凝膠中提取完整的蛋白質。 b.用於其他服務的凝膠條帶應切成約1毫米的立方體。 c.用於所有其他服務的

• • 在提交樣品之前，是否可以討論專案？

  歡迎您隨時與我們討論專案。相關服務:蛋白分析

• • 你們使用哪個資料庫搜索引擎進行蛋白質鑑定？

  對於大多數資料，我們使用帶有內建 Sequest HT 搜索引擎的 Proteome Discoverer 軟體。我們將另外使用 Byonic 來獲取磷或糖資料。我們還有 Maxquant 套件。相關服務:蛋白分析

• • 你們接受放射性樣品進行分析嗎？

  我們不提供任何放射性材料或耗盡的放射性材料的評估。穩定同位素標記的化合物/材料，即碳-13、氘等，可以接受樣品提交。相關服務:蛋白分析

• • 需要提交多少樣本來進行蛋白質鑑定？代謝組學？脂質組學？

  通常，對於蛋白質鑑定分析，考馬斯染色的凝膠條帶會相對容易地產生陽性結果。理想情況下，條帶中含25-50 ng的蛋白質。對於代謝組學和脂質組學樣品，100萬個細胞，10-100mg組織，50-200uL血清/血漿和50uL尿液是樣品的標稱量。相關服務:樣品製備

• • 樣品可以由客戶預處理和分析嗎？

  鼓勵客戶/研究者使用我們提供的預先批准的方法自行處理樣品。通常，提前處理的樣品允許更快的儀器週轉時間，因為提取和其他處理步驟不需要資源和時間。相關服務:蛋白分析