蛋白分析FAQ彙總
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1、牛血清白蛋白封閉緩衝液:優點—相容所有檢測系統和抗體、允許更高的靈敏度檢測;缺點—不抑制非特異性抗體結合、封閉不太完全、價格較貴。2、脫脂奶粉封閉緩衝液:優點—價格低廉、封閉完全、可減少非特異性抗體結合;缺點—與磷酸化抗體不相容、與親和素/生物素檢測系統不相容。3、Boster TBS
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SDS-PAGE是按相對分子量分離蛋白質的最廣泛的方法。在SDS(一種離子洗滌劑)的作用下蛋白質發生變性、線性化並充滿負電荷。這使其可以在電場加壓下載凝膠中進行遷移。較大的蛋白質遷移速度比較小的蛋白質慢,於是,蛋白依賴大小不同而分離開來。爲了獲得理想的分離效果,凝膠濃度和執行條件必須根據所研
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凝膠的濃度主要由兩個因素決定:所用丙烯醯胺的濃度以及丙烯醯胺與雙丙烯醯胺的比例。較高濃度的丙烯醯胺會形成密度更高、孔徑更小的凝膠,這是高解析度分離低分子量蛋白質的理想凝膠。雙丙烯醯胺會在丙烯醯胺分子之間形成交聯;改變丙烯醯胺與雙丙烯醯胺的比例可以用來微調凝膠的濃度和孔徑。相關服務:基於SDS
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每個蛋白質印跡實驗都涉及在不同條件下與獨特樣品相互作用的獨特抗體。沒有一種抗體或抗原濃度適用於每個實驗。爲了獲得最完美的蛋白質印跡,需要最佳化抗體濃度。理想的抗體濃度取決於抗原濃度、抗體的特異性和親和力以及緩衝液組成等實驗條件。次優抗體濃度會導致幾個常見錯誤包括弱訊號、非特異性條帶以及斑點或
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TMT-MS2是標準定量蛋白質組學的工作流程,用於在不需要濃縮磷酸肽的情況下分析細胞和組織。該工作流程將串聯質譜標籤(TMT)與最先進的質譜(MS)以及生物資訊學相結合,以極為精確的方式提供最廣泛和最深入的蛋白質組分析。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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幾乎所有醫療領域的所有樣本型別都可以運用TMT-MS2研究,但其最適合用於在大規模蛋白質組研究中分析細胞和組織裂解物。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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TMT-MS2研究中的樣本多路複用可以使用TMT-11和TMTpro-18plex來實現。當樣本數量超過18個樣本時,其中一個通道被用作一個合併的參考橋接通道,這樣每個TM1-18plex集包含17個研究樣本加上參考樣本。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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標準的TMT標記方案要求每個樣本至少有100µg的總蛋白。其次,還需至少50µg的總蛋白用於樣品質量控制,以評估樣品分析的準確性。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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TMT-MS2的標準資料輸出是QuantSheet,一個Microsoft Excel檔案。當然也可以提供其他格式,如.CSV或.txt。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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雖然TMT-MS3研究可以分析各種領域的所有樣本型別,但其最適用於對定量準確性要求較高的血漿生物標記物發現和其他高度複雜的樣本分析。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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