蛋白分析FAQ彙總
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當然可以,基於TMT的工作流流程與各種蛋白質組技術相容。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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TMT-MS3是用於發現血漿生物標誌物和分析其他高度複雜樣本的標準工作流程,其最大的優勢是定量的準確度高。該工作流程結合串聯質標籤(TMT)、先進的質譜(MS)、MS3碎片和生物資訊學,在保持良好的覆蓋度的同時提供最準確的定量結果。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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• 為什麼要選擇TMT-SRM而不是SRM析來驗證候選生物標記物?
TMT-SRM特別適合於在TMT工作流程(TMT-MS2、TMT-MS3)中驗證候選者,與經典SRM相比,它提供了一種更快、更便宜的生物標記驗證方法。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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• TMT-SRM相比基於抗體的方法來驗證候選生物標記物的優勢?
TMT-SRM分析可以在一次分析中驗證候選生物標誌物,無需為Western Blotting或ELISA試劑盒購買多個抗體。且TMT-SRM特別適合驗證沒有商業抗體的蛋白質和翻譯後修飾。相關服務:基於TMT的蛋白質組學分析
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• 串聯質量標籤(Tandem Mass Tag,TMT)試劑的主要用途是什麼?
TMT 技術被用於單獨標記不同的蛋白質樣品,以便將這些樣品組合成單個樣品進行 LC-MS 分析。該工作流程的主要優點是樣品通量更高、儀器分析時間更少、重複之間肽定量的精度高,以及不同樣品中缺失的定量蛋白質更少。相關服務:基於標籤的蛋白質定量技術-iTRAQ,TMT,SILAC
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SILAC 可用於同時分析2到3個樣品。TMT 試劑可用於同時分析6至11個樣品。TMTpro 試劑可用於同時分析多達16個樣品。相關服務:定量蛋白組分析
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Label-free、TMT 試劑和 TMTpro 試劑可用於任何蛋白質樣品型別。SILAC 和 Neucode 定量只能用於可進行代謝標記的細胞系和模型生物。相關服務:定量蛋白組分析
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TMT 試劑和 TMTpro 試劑是具有不同質量的不同化學品。因此,不建議混合這兩個標籤,因為合併後的樣本會更加複雜而導致定量的蛋白質更少。相關服務:基於標籤的蛋白質定量技術-iTRAQ,TMT,SILAC
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• 與未標記的樣品相比,TMT 標記的樣品中的肽/蛋白質鑑定數量較少,這怎麼辦?
建議對樣品進行分餾,以降低 LC-MS 分析之前的樣品複雜性,從而增加多重樣品的可定量肽/蛋白質的數量。相關服務:基於標籤的蛋白質定量技術-iTRAQ,TMT,SILAC
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透過使用 TMT/TMTpro 作為變數(即動態)修飾肽氨基末端和賴氨酸來搜尋肽,可以確定單個標記樣品的標記效率。對於大多數樣品的完整標記,肽與標籤的質量比(w:w)應為 1:4 至 1:8。TMT/TMTpro 試劑的不當儲存或處理會導致標籤上的 -NHS 基團水解,從而使試劑的反應性降低
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