蛋白分析FAQ彙總
-
通常，如果您在用藍色染料染色後在凝膠上看到任何蛋白質條帶的跡象，我們將能夠成功鑑定蛋白質。但銀染條帶可能不行，如果蛋白質的實際含量在低飛摩爾範圍。然而，我們通常可以成功地從銀染凝膠條帶中鑑定出蛋白質。相關服務:蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質鑑定
-
對此沒有一個確切的答案，因為它取決於幾個因素。一般來說，如果你能在凝膠上看到它，我們就可以鑑定這個蛋白質。如果蛋白質鑑定樣品是溶液，它將在很大程度上取決於溶液的純度、溶液的複雜性、是否接觸去汙劑和聚合物、是否接觸蛋白酶抑制劑、蛋白質的量等等。原則上，LTQ-FT 的靈敏度在attomole範
-
• 如何準備用於翻譯後修飾分析的複雜混合物樣品（如細胞系/組織）？
對於深度磷酸化蛋白質組學，樣品製備通常由客戶進行，並且在磷酸化富集前或後將消化蛋白質直接提交用於的 LC-MS / MS 分析。我們可根據您的特定需求提供樣品製備。請在提交樣品之前與我們聯絡以討論您的需求。 僅 LC-MS/MS 分析：我們要求每個樣品至少 5 μg 磷酸化蛋白。注意：在分析
-
• 如何準備用於非變性質譜（Native MS）分析的樣品？
我們要求至少20 μL樣品，濃度為20 μM，在質譜分析之前需要脫鹽，我們提供這項服務。對於蛋白質-配體測量，請分別提供蛋白質和配體以及結合親和力/比率的估計值，以便混合分析物以確保複合物的形成。 注意：PEG，甘油和洗滌劑不適合質譜分析，在提交樣品之前必須去除。我們可以嘗試對較低體積/濃度
-
對於定量蛋白質組學，樣品製備通常由客戶進行，並且提交的消化蛋白質直接用於LC-MS/MS分析。我們可根據您的特定需求提供樣品製備。請在提交樣品之前與我們聯絡以討論您的需求。 對於LC-MS/MS分析，我們要求每個樣品至少5μg。在消化之前必須準確測量蛋白質濃度。注意：在分析之前必須執行脫鹽步
-
雙向熒光差異凝膠電泳（2D DIGE）有助於蛋白質組（樣品中的所有蛋白質）的比較，以確定特定蛋白質水平的差異。在 2D DIGE 中，單個凝膠上可執行兩個或多個樣品。在電泳之前，每個樣品中的蛋白質都用不同的熒游標籤標記。然後將得到的2D凝膠在每個熒光團最優的激發和發射條件下成像，為每個樣品生
-
2D凝膠電泳是蛋白質組學研究的一個核心工具。傳統的聚丙烯醯胺凝膠電泳（PAGE）按大小分離蛋白質；然而，2D PAGE增加了一個額外的步驟，其中蛋白質首先透過等電點分離。 在得到的二維分佈中，可以區分多達10000個蛋白質，從而提供樣品蛋白質組的概述。比較生物樣本之間的蛋白質組具有強大的科學
-
2D DIGE實驗包括對每個影象進行歸一化，識別蛋白質斑點，匹配不同樣品中代表相同蛋白質的斑點，量化每個斑點的強度，以及計算每個斑點在被比較樣品之間的強度比。代表相同蛋白質的斑點之間強度的差異表明了樣品之間蛋白質丰度的變化。相關服務:2D-DIGE定量蛋白質組學
-
2D DIGE資料的質量取決於2D凝膠熒光影象的質量。準確鑑定和定義蛋白質斑點，以及準確定量每個蛋白質斑點的強度需要：具有寬動態範圍的影象；沒有光斑強度飽和的影象；可檢測低丰度蛋白質的高靈敏度影象；影象在整個視野中沒有位置效應。相關服務:2D-DIGE定量蛋白質組學
-
• 2D DIGE凝膠應在何時用Deep Purple染色？
在所有CyDye掃描完成之前，不應使用Deep Purple固定或染色2D DIGE凝膠。在掃描CyDyes之前進行固定會影響定量並導致高背景。相關服務:2D-DIGE定量蛋白質組學
How to order?
