如何準備用於翻譯後修飾分析的複雜混合物樣品(如細胞系/組織)?
對於深度磷酸化蛋白質組學,樣品製備通常由客戶進行,並且在磷酸化富集前或後將消化蛋白質直接提交用於的 LC-MS / MS 分析。我們可根據您的特定需求提供樣品製備。請在提交樣品之前與我們聯絡以討論您的需求。 僅 LC-MS/MS 分析:我們要求每個樣品至少 5 μg 磷酸化蛋白。注意:在分析之前必須執行脫鹽步驟。我們強烈建議使用 4h 梯度來最大化磷酸肽的鑑定數量。 磷酸化富集和分析:由於通常檢測到的被磷酸化的肽小於1%,因此我們至少需要 200μg 的總消化蛋白質。我們使用 TiO2 或 FeIMAC 進行磷酸化富集。 注意:PEG,甘油和洗滌劑不適合進行質譜分析,必須在提交樣品之前去除。我們可以嘗試對較低體積/濃度的樣品進行分析,但不能保證結果。
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