蛋白分析FAQ彙總
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是的。我們有專門的質譜儀供化學組測試他們的合成產品。質量精度到小數點後兩位。如果您想知道機器是如何工作的,那麼我們可以解釋,但大多數人只想要結果。我們可以向您展示如何開啟預製方法並載入樣本,然後按“開始”按鈕。相關服務:蛋白分析
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• 質譜 (MALDI) 無法獲得蛋白質準確的分子質量的可能原因是什麼?
與SDS PAGE顯示的質量不同,可能是因為SDS PAGE的準確性的問題。也可能是由於提取方法或基質導致蛋白質破裂。相關服務:蛋白分子量測定
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• MALDI-MS鑑定出的一些蛋白質的序列覆蓋率值較低(<30%),肽質量指紋識別的序列覆蓋率是否有標準可接受的值?
這需要考慮您正在分析的樣本是屬於模式生物還是非模式生物,因為這會極大地改變遊戲規則——尤其是當您正在執行針對資料庫進行肽匹配的自動化演算法時。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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• 來自 RNA/DNA/蛋白質提取試劑盒的蛋白質是否可在 MALDI-TOF MS 中檢測?
原則上是可以的,主要取決於起始材料的量。相關服務:蛋白質質譜鑑定
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• 可以使用 Trizol(Tri-reagent)進行多反應監測 (MRM) 質譜分析的蛋白質提取嗎?
可以。但在進行消化之前,您可能需要進行緩衝液交換。相關服務:MRM/PRM定量蛋白組學分析
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• 在胰蛋白酶消化前,可以透過離心柱對不同大小的蛋白質進行分離嗎?
離心柱通常用於脫鹽,即從小分子中分離蛋白質(或其他大分子)。它們通常不用於分離不同的蛋白質。您可以使用 HPLC 或 UPLC 尺寸排阻色譜法,或自上而下的質譜法。相關服務:蛋白分析
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• 為什麼抗磷酸酪氨酸抗體容易出現高背景和/或訊號減弱的現象?
檢查是否是封阻出現問題。脫脂奶粉適用於所有蛋白印跡,但磷酪氨酸印跡除外,磷酪氨酸印跡具有與膜結合的磷酸化蛋白。用該試劑進行阻斷會導致蛋白存在潛在的表位。稀釋該溶液中的抗磷酸酪氨酸抗體將佔據許多表位,留下較少的抗體可用於檢測。因此建議在TBS+吐溫20中使用1%的BSA作為阻斷溶液。相關服務:
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• 為什麼我的抗體活性在蛋白質印跡中會隨著時間的推移而降低?
可能有這些原因:1、使用了不同的樣品;2、樣品在儲存中或反覆凍融時降解;3、抗體被汙染;4、樣品在儲存中或反覆凍融時降解導致蛋白質轉移效率低下。相關服務:蛋白質免疫印跡和電轉移服務
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我們已經在 LTQ-FT 儀器上展示了對蛋白質鑑定 的 50 attomole 的靈敏度。這是透過 1 皮摩爾的 BSA 蛋白質標準品消化完成的,然後將 50 attomole 的等分試樣注射入柱中。在 Mascot 資料庫搜尋中鑑定出 8 到 10 個肽。相關服務:蛋白分析
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透過 IMAC 純化分離磷酸化肽可能需要 10皮摩爾或更多的磷酸化蛋白質。然而,這取決於磷酸化肽序列。TiO2是用於分離磷酸化肽的一種可替代且非常靈敏的方法。我們可以使用 IMAC(Galium 或 Fe)或 TiO2來富集蛋白質消化後的磷酸化肽。一些磷酸化可能相對不穩定且難以分析。相關服務
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